消化器癌の浸潤・転移制御を行うkelch関連遺伝子を用いた新しい遺伝子治療の開発

利用kelch相关基因开发新的基因疗法来控制胃肠癌的侵袭和转移

• 批准号: 16591293
• 负责人: 軍司 祥雄
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16591293/
• 关键词: Nd1; 接着分子; 転移; β-カテニン; 腫瘍

Nd1はkelchファミリーに属するアクチン結合蛋白でありBTB/POZ domainと6つのkelch motifをもつLong form(Nd1-L)と、kelch motifを欠くshort form(Nd1-S)が存在する。Nd1-L蛋白はヒト、マウスで保存されほぼ全組織で発現を認める。今年度はNd1-Lが抗癌剤doxorubicinの心毒性を保護するのに重要な役割をすること、またNd1-Sは核内に局在して細胞周期制御にかかわっていることを明らかにした。さらに生体内でのNd1-Lの機能を調べるためにアクチンプロモーターを用いて全身にNd1-Lを強発現させたトランスジェニック(Tg)マウスを作製したところ、生後一年以上経過すると主に腹腔内リンパ節、肝臓、腎臓に様々な腫瘍が高率に発生した。そこで、Nd1-Lの過剰発現による細胞がん化の機序を明らかにする目的で、Nd1-Lを強発現したトランスフェクタントにおけるactin cytoskeleton関連タンパクの動態を調べた。その結果、Nd1を過剰発現した細胞株では核内にβ-cateninが移行している細胞が多く認められ、ウエスタンブロット法においても核内でのβ-cateninの量が増加していた。また免疫沈降法でNd1-Lはkelch motifを介してβ-cateninと会合す事を見いだした。またNd1 transfectantはコントロールに比べて細胞接着が亢進していることがCell adhesion assayで明らかとなった。現在、マウス悪性黒色腫細胞B16や、大腸癌細胞Colon 26を用いてNd1-Lトランスフェクタントを作成し、また、Tgマウス由来の腫瘍細胞におけるβ-cateninおよびその周辺のシグナル系およびNd1とカドヘリン、インテグリンなどの接着分子との関連および腫瘍の転移とNd1の発現の相関などについての解析を進めている。

Nd1 kelch motifs Long form(Nd1-L) kelch motifs short form(Nd1-S) exist. Nd1-L protein is preserved in whole tissues. This year, Nd1-L plays an important role in the protection of doxorubicin from cardiotoxicity. Nd1-S plays an important role in cell cycle control. The function of Nd1-L in vivo is modulated, and Nd1-L is strongly expressed in the whole body, and it is mainly produced in the abdominal cavity, liver and kidney at a high rate after more than one year of life. In addition, the Nd1-L transition mechanism is clearly defined, and the Nd1-L transition mechanism is strongly modulated by actin cytoskeleton. As a result, Nd1 protein was found in cell lines, and the amount of β-catenin in the nucleus increased. The Nd1-L kelch motif is the key to the β-catenin convergence. The Cell adhesion assay was developed in response to the first transfection. Now, it is necessary to use Nd1-L-catenin to prepare the protein of tumor cell origin, and analyze the relationship between Nd1-L-catenin and Nd1-L-catenin in B16 and Colon 26 cells.

项目成果

Overexpression of Nd1-s, a variant form of new kelch family protein, perturbs the cell cycle progression of fibroblasts.

• DOI: 10.1089/dna.2005.24.30
• 发表时间: 2005-01
• 期刊: DNA and cell biology
• 影响因子: 3.1
• 作者: A. Inoue;Myengmo Kang;L. Fujimura;Yasuyuki Takamori;K. Sasagawa;H. Itoh;T. Tokuhisa;M. Hatano

Protective role of Nd1 in doxorubicin-induced cardiotoxicity

• DOI: 10.1016/j.cardiores.2004.07.009
• 发表时间: 2004-11-01
• 期刊: CARDIOVASCULAR RESEARCH
• 影响因子: 10.8
• 作者: Fujimura, L;Matsudo, Y;Hatano, M
• 通讯作者: Hatano, M