酵母人工染色体を用いた遺伝性早期老化症の研究(2)

利用酵母人工染色体研究遗传性早衰（2）

• 批准号: 02240201
• 负责人: 中井 博史
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02240201/
• 关键词: 遺伝子マッピング; 酵母人工染色体; 21番染色体DNA; in situ雑種形成法; 蛍光 in situ雑種形成; 遺伝性早期老化症

1.要約代謝異常,脳変性疾患など遺伝疾患に関わる各種遺伝子のヒト染色体上の座位を決定してきた。コケイン症候群,色素性乾皮症の患者の新しい家族検出と調査,遺伝解析のため細胞株樹立,登録を行った。更に,ダウン症候群,家族性早期発症型アルツハイマ-病の遺伝的背景を知るため,21番染色体の遺伝子解析として,同染色体特異的なcDNAや,酵母人工染色体を用いた巨大DNAクロ-ンのマッピングを行った。2.結果重い知能退行をきたすプロクド-シス,テイザックス病などの原因酵素である。プロリダ-ゼ,βーヘキソサミニダ-ゼαサブユニットの遺伝子座位を高精度in situ雑種形成法にて決定,各々19番染色体短腕p13.2と15番染色体長腕qー23ーq24であった。21番染色体のコスミドクロ-ンに続き、今回はcDNA3個を21番染色体q21,q11.2ーq21,及びq22.3に各々局在部位を決定した。また、添田らが酵母人工染色体を用い分融した21番染色体の巨大DNA断片についてPCR装置で増ゆしたYACAluPCR産物(YACーRーI)を21q21ーq22.1部位にアップ。約160Kbの巨大DNAクロ-ンのマ-カとしてその存在領域を示した。これらのマッピングはトリチウムを用いたin situ雑種形成と、今回購入した高感度カメラコントロ-ルユニットとビデオモニタ-を使い、蛍光法による(アイソト-プを用いない)方法を行い比較検討した。今後これらの方法は更に有用となると思われた。

1. Metabolic abnormalities, genetic disorders, genetic disorders, New family identification, genetic analysis, cell line establishment, registry of patients with Xeroderma pigmentosum syndrome. In addition, the background of familial early onset syndrome, familial early onset syndrome, and genetic analysis of chromosome 21, isomyosome specific cDNA pairs, yeast artificial chromosomes, and large DNA fragments were identified. 2. The results showed that the enzyme responsible for the disease was identified. The locus of the gene was determined with high precision in situ hybridization method, and each chromosome was 19-fold short wrist p13.2-fold long wrist q-23-fold q24-fold. The position of chromosome 21 is determined by the position of chromosome q21, q11.2, q21 and q22.3. YACALUPCR product (YAC-R-I) at q21 and q22.1 was obtained by PCR. About 160Kb of giant DNA is shown in the field of existence. This is a comparison of the methods used in the study. In the future, the method will be more useful.

项目成果

H.Hagiwara,T.Takeda,H.Ikeda,B.Burchell,and H.Nakai.: "Gene mapping of human bilirubin UDPーglucuronosyl transferase on 1q21ーq23 by a cell sorter and <in situ>___ー hybridization." Japanese J.of Human Genetics. (1991)

H. Hagiwara、T. Takeda、H. Ikeda、B. Burchell 和 H. Nakai.：“通过细胞分选仪和 <原位>___- 杂交对 1q21-q23 上的人胆红素 UDP-葡萄糖醛酸基转移酶进行基因定位。”日本人类遗传学杂志（1991）。

Y.Tazawa,M.kikuchi,I.Kurobane,H.Nakai et al.: "An acute form of tyrosinemia type l with multiple intrahepatic mass regions." J.of pediatric gastroenterology and nutrition. 10. 536-539 (1990)

Y.Tazawa、M.kikuchi、I.Kurobane、H.Nakai 等人：“一种急性形式的 l 型酪氨酸血症，伴有多个肝内肿块区域。”

D.M.Radford,H.Nakai et al.: "Two chromosomal locations for human ornithine decaboxylase gene sequences and elevated expressinon in colorectal neoplasia." Caner Research. 50. 6146-6153 (1990)

D.M.Radford、H.Nakai 等人：“人鸟氨酸脱羧酶基因序列的两个染色体位置和结直肠肿瘤中表达升高。”

K.Takeda,H.Nakai et al.: "Fine assignment of ーHexaminidase A ーsubunit on 15q23ーq24 by high resolution <in situ>___ー hybridization." Tohoku J.of Experimental Medicine. 160. 203-211 (1990)

K.Takeda、H.Nakai 等人：“通过高分辨率 <原位>___- 杂交对 15q23-q24 上的 -六氨基糖苷酶 A 亚基进行精细分配。”Tohoku J.of Experimental Medicine 160. 203-211（1990） ）

H.Tashiro,K.Ozawa,T.Kai,T.Miwa,H.Nakai et al.: "Genetic study of an endーspecific single DNA marker generated by “YACー<Alu>___ー PCR"." Genomics.

H. Tashiro、K. Ozawa、T. Kai、T. Miwa、H. Nakai 等人：“通过“YAC-<Alu>___- PCR”生成的末端特异性单一 DNA 标记的遗传学研究。”基因组学。