染色体凝縮因子の活性化の機序に関する生化学的研究

染色体浓缩因子激活机制的生化研究

• 批准号: 02260202
• 负责人: 山下 茂
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02260202/
• 关键词: 染色体凝縮; 成熟促進因子; 細胞周期; cdc2キナ-ゼ

生理的染色体凝縮因子であるMPF(maturationーpromoting factor:成熟促進因子)の自己活性化におけるcdc2キナ-ゼの役割を解明するため、プロテインキナ-ゼ阻害薬であるKー252誘導体及びスタウロスポリンのcdc2キナ-ゼ活性に対する効果を調べた。また一部の薬物につきMPF活性とcdc2キナ-ゼ活性に対する効果の並行性について検討した。アフリカツメガエル未受精卵をβーグリセロリン酸及びEGTAを含む溶液中で破砕し、20,000g遠心上清のOー34%硫安画分をとり、このMPF活性を無細胞系で精子核の染色体凝縮を観察する方法で定量化し、ヒストンH1を基質としてcdc2キナ-ゼ活性を測定した。Kー252a、スタウロスポリンは30及び3μMのIC_<50>でMPF活性を、6及び0.9μMのIC_<50>でcdc2キナ-ゼ活性を抑制した.これは、両活性に対する阻害薬の効果がほぼ並行することを示唆する。Kー252b、KT5926は0.3及び120μMのIC_<50>でcdc2キナ-ゼ活性を抑制した。cdc2キナ-ゼ活性に対する抑制の強さは、Kー252b>スタウロスポリン>Kー252a>KT5926の順で、Cキナ-ゼ、Aキナ-ゼ、Gキナ-ゼ、ミオシン軽鎖キナ-ゼに対する阻害の強さの順序とは異なる。従って、これらの阻害薬に対する感受性のパタ-ンはcdc2キナ-ゼの特性を示すものである。今後更に研究を進め,タンパク質リン酸化に依存したMPFの活性化がみられる無細胞系にこれらのプロテインキナ-ゼ阻害薬を作用させることによりMPF活性化に対する抑制効果を調べ、上記のcdc2キナ-ゼに対する効果と比較する予定である。これにより、MPFの活性化に必要なタンパク質リン酸化に対するcdc2キナ-ゼ自身の寄与を知ることができる。

Physiological chromosome condensation factors such as MPF(maturation promoting factor) regulate the activation of cdc2 and its effects on the activation of cdc2. A part of the substance is detected by MPF activity and cdc2 is detected by MPF activity. Methods for Quantification, Detection of Chromosome Condensation of Sperm Nuclei in Cell Line Free Cells Using 0 - 34% Sulphur in 20,000 g of Diaphragm and EGTA K-252a, C-252b<50><50>, C-252a, C-25252b, C-25252a, C-25252b, C-2 This is the first time I've ever seen a person who's been in a relationship with someone else. K-252b, KT-5926 IC_c2-activity is inhibited at 0.3 and 120μM<50>. cdc2- For example, the sensitivity of the resistance to radiation and radiation can be determined by the characteristics of radiation. In the future, further research will be carried out on the regulation of MPF activation and inhibition effects in cell-free systems, and on the comparison of cdc2 and cdc 3. The activation of MPFs is necessary to improve the quality of the products.

项目成果

山下 茂: "細胞周期の進行に対するプロテインキナ-ゼ阻害薬の効果" 日本薬理学雑誌. 96. 67T-67T (1990)

Shigeru Yamashita：“蛋白激酶抑制剂对细胞周期进展的影响”日本药理学杂志 96. 67T-67T (1990)。