卵成熟過程において卵成熟促進因子の作用を抑える因子の同定

卵母细胞成熟过程中抑制卵母细胞成熟促进因子影响的因素的鉴定

• 批准号: 62540562
• 负责人: 岸本 健雄
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1987
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1987 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62540562/
• 关键词: 卵成熟促進因子; MPF; 分裂中期; 分裂後期への移行; G1期; MPFの不活化因子; マウス卵; 酵母

卵成熟促進因子(maturation-promoting factoriMPF)は, 単に卵母細胞にとどまらず真核細胞一般において, 分裂中期促進作用をもつ蛋白質である. 卵成熟過程においてMPF活性は, 各分裂中期に最高値に達し極体放出時には消失して, 減数分裂周期に応じて変動する. 本研究の目的は, MPF活性消失の意義と機構を明らかにして, MPF活性の調節機構を解明する糸口を得ることにある. 本年の研究の結果, 以下のことが判明した.1.マウス末成熟卵は濾胞から培養液中に単離すると, 自然成熟をおこす. この際サイトカラシンDで処理すると, 第1減数分裂中期の状態で成熟分裂の進行は停止し, MPF活性は高いままに維持された. こうした時さらにシクロヘキシミドを加えると, MPF活性は減少・消失し, その後を追って染色体は両極へ分離し, やがて脱凝縮して核様の構造体が2個形成された. 従って, MPF活性の消失は分裂中期から後期への移行を促すといえる.2.酵母Saccharomyces cerevisiaeにも, M期にはMPF活性が存在しているが, G1期には存在しない. そこで温度感受性突然変異体cdc20株を制限温度(36°C)で培養して核分裂中期に同調させたあと, 許容温度(24°C)に下げて細胞周期をG1期まで同調的に進行させ, そこから細胞質抽出物を得た. これと酵母MPF粗分画とを混合すると, MPF標品中に当初あったMPF活性が消失した. このことは, G1期の細胞内にはMPF活性を抑える因子 (suppressor MPF;supMPF)が存在している可能性を示唆している.以上の結果から, 卵成熟時におけるMPF活性の周期的変動のうちの減少の方は, supMPFがMPF活性を抑えることに起因し, これが分裂中期から後期への移行の引金になると考えられる. 現在, supMPFに対する蛋白分解酵素, Ca等の影響を検討中であり, supMPFの大まかな化学的性質をまず明らかにしていきたい.

Egg maturation-promoting factor (MPF) is a protein that promotes metaphase in eukaryotes. During egg maturation, MPF activity reaches its peak at metaphase and disappears when polar bodies are released. The purpose of this study is to clarify the mechanism of MPF activity disappearance and the mechanism of MPF activity regulation. The results of this year's study are as follows: 1. The immature eggs are isolated from the culture medium and naturally mature. During the treatment, the meiosis of metaphase 1 was stopped and MPF activity was maintained at a high level. The MPF activity decreased and disappeared, and then the chromosome was separated, and two nuclear structures were formed. 2. In yeast Saccharomyces cerevisiae, MPF activity existed in M phase, but existed in G1 phase. The temperature sensitivity of the mutant cdc20 strain was abruptly changed. The limit temperature (36°C) was used to culture the mutant cdc20 strain. The mitotic metaphase was isochronous. The tolerance temperature (24°C) was used to culture the mutant cdc 20 strain. The activity of MPF in yeast samples was lost. This indicates the possibility of the existence of suppressor MPF (supMPF) in G1 cells. As a result, the changes in MPF activity during egg maturation and the decrease in MPF activity during egg maturation are the causes of MPF activity inhibition during metaphase and anaphase. Now, supMPF is under investigation for the effects of proteolytic enzymes, Ca, etc., and the chemical properties of supMPF are under investigation.

项目成果

T. Kishimoto: Develop. Growth Differ.30. (1988)

T. Kishimoto：开发。