導入遺伝子に基づく個体発がんの研究

基于导入基因的个体致癌研究

• 批准号: 06280224
• 负责人: 権藤 洋一
• 金额: $ 12.8万
• 依托单位: Tokai University (1995)Kyushu University (1994)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06280224/
• 关键词: トランスジェニックマウス; ジーンターゲッティング; 発がん; ras; p53; マウス; 突然変異; がん関連遺伝子

本研究では、がん遺伝子、がん抑制遺伝子をジーンターゲティング法などを用いて、破壊、置換、導入を行なった。そのための方法の開発と、個体に及ぼす実際の影響を解析した。また、遺伝子の突然変異が発がんと関わっていることが、分子、細胞レベルから明らかなとなっているので、個体レベルでの検証も行なった。そのためのトランスジェニックマウスも開発した。H-ras遺伝子欠損マウスは正常のものと差がみられなかったので、N-ras遺伝子およびK-ras遺伝子欠損マウスを作成した。N-ras遺伝子欠損マウスはやはり生存し、正常のものとこれまでのところ違いが認められない。K-ras遺伝子欠損マウスは、すべて、胎生期もしくは出生後まもなく死亡し、生存に不可欠であることがわかった。H-ras遺伝子欠損の胎児繊維芽培養細胞を用いて、いろいろな成長因子の効果を検討したところ、正常の繊維芽細胞と違いがみられず正常なシグナルトランスダクションが行なわれていることが示された。すなわち、他の遺伝子がH-ras遺伝子の機能を補完していると思われる。(分担、中村)二段階相同組換え法の改良に成功し、マウスp53遺伝子を、ヒトのp53遺伝子や大きな欠失をもつp53遺伝子などにつぎつぎと置換することに成功し、目的としていた普遍的な遺伝子置換法をまずは確立できた。得られたES細胞からマウス個体を得て、また、交配もすることによって、p53遺伝子の生体内での機能を解明している。すでに得ていたp53遺伝子欠損マウスと、体細胞突然変異を検出するためのシャトルベクターをもつトランスジェニックマウスを交配した。その子孫を用いて、放射線照射の有無の影響も含め、突然変異の生じる頻度およびDNA変化の解析を始めた。(分担、権藤)

This study で は, が ん heritage 伝, が ん inhibit heritage 伝 son を ジ ー ン タ ー ゲ テ ィ ン グ method な ど を with い て line, broken 壊, replacement, import を な っ た. The development of そ ため ため <s:1> method <e:1> is と, individual に and ぼす actual <s:1> influence を analysis た. ま た, but 伝 の suddenly - different が 発 が ん と masato わ っ て い る こ と が, molecular, cellular レ ベ ル か ら Ming ら か な と な っ て い る の で, individual レ ベ ル で の 検 line card も な っ た. Youdaoplaceholder0 そ ため ため トラ トラ スジェニッ スジェニッ スジェニッ ウス ウス ウス そ development た. H - traces of ras 伝 son owe loss マ ウ ス は normal の も の と poor が み ら れ な か っ た の で, N - traces of ras 伝 son お よ び K - traces of ras 伝 son owe loss マ ウ ス を made し た. N - traces of ras 伝 son owe loss マ ウ ス は や は し り survival and normal の も の と こ れ ま で の と こ ろ violations い が recognize め ら れ な い. K - traces of ras 伝 son owe loss マ ウ ス は, す べ て, TaiShengQi も し く は after birth ま も な く し death and survival に not owe で あ る こ と が わ か っ た. H - traces of ras 伝 son owe loss の tire where 繊 d bud culture cells を using い て, い ろ い ろ な growth factor の unseen fruit を beg し 検 た と こ ろ, normal の 繊 d bud cells と violations い が み ら れ ず normal な シ グ ナ ル ト ラ ン ス ダ ク シ ョ ン が line な わ れ て い る こ と が shown さ れ た. Youdaoplaceholder0, his cultural heritage 伝 son がH-ras cultural heritage 伝 son <s:1> function を complete て て ると ると thought われる. (share, nakamura) two Duan Jie same group in え method modified に の success し, マ ウ ス p53 heritage 伝 を, ヒ ト の p53 heritage 伝 や son big き な owe lost を も つ p53 heritage 伝 son な ど に つ ぎ つ ぎ と replacement す る こ と に し success, purpose と し て い た な of common 伝 son displacement method を ま ず は establish で き た. Have to ら れ た ES cells か ら マ ウ ス individual を て, ま た, mating も す る こ と に よ っ て, p53, but 伝 の born in vivo で の function を interpret し て い る. す で に have て い た p53 heritage 伝 son owe loss マ ウ ス と, somatic suddenly - different を 検 out す る た め の シ ャ ト ル ベ ク タ ー を も つ ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス を mating し た. そ の sons を with い て, radiation の presence of の influence も め, suddenly - born different の じ る frequency お よ び DNA - the の parsing を beginning め た. (Share, 権 vine)

项目成果

Y. Gondo, et al.: "A novel positive detection system of in vivo mutations in rpsL (strA) transgeric mice." MutationRes.(in press). (1996)

Y. Gondo 等人：“一种新型的 rpsL (strA) 转基因小鼠体内突变阳性检测系统。”

H. Yamaguchi et al. (K. Nakamura): "Dopamine D2 receptor plays a critieal rele in cell prcliferation and propicomelanocartin expression in the pituitary." Genes to Cell. (in press). (1996)

H.山口等人。

権藤洋一.他: "「疾患・モデルマウス」HITECマウス:トランスジェニックマウスを用いた体細胞突然変異解析系" 中山書店, 5 (1994)

Yoichi Gondo 等：“‘疾病/模型小鼠’HITEC 小鼠：使用转基因小鼠的体细胞突变分析系统” Nakayama Shoten, 5 (1994)

Y. Tokita et al. (K Nakamura): "Characterization of exciatory amino acid neurotoxicity in N-methyl-D-aspartate receptor-drpicient mause cartieal neuronales." Eur J. Neurasci.(in press). (1996)

Y. Tokita 等人。

M. Masa et al. (K.Nakamura): "Specific deficit of the ON resperse in visual transmission by fargeted disraption of the mGlaR6 gene." Cell. 80. 757-765 (1995)

M.玛萨等人。