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M期とS期のカップリングの機構

M相和S相耦合机制

基本信息

批准号：
07254204
负责人：
岸本健雄
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

通常の体細胞型細胞周期においてはM期とS期の交互交替が保障されているのに対し、減数分裂ではM期が連続して起こり、その後の受精でS期が創設される。こうした卵細胞に特異的なS期開始の調節機構を手がかりとして、M期とS期の共役機構を解明することが本研究の目的であり、本年度は以下の成果を得た。1.減数分裂周期:アフリカツメガエル卵抽出物由来の、無細胞系で減数分裂周期を再現できるmeiotic cycling extractsを開発して解析した。その結果、この無細胞系では、卵抽出物を単に希釈するだけで減数分裂期間にS期をもたらすことができると判明した。減数分裂期間におけるS期の抑制にはMos-MAPキナーゼ・カスケードの関与が示唆されているので、N末を欠いたSTE11(MAPKKK)蛋白質によってMAPキナーゼを構成的に活性化させたが、無細胞系を希釈したとき、あるいは無細胞系にMosの中和抗体を加えたときにもたらされるS期を抑制することはできなかった。現在、構成的に活性型であるMAPK-γ-Sを作製して、Mosの下流はMAPキナーゼだけかどうかを検討中である。2.受精によるS期開始:ヒトデ卵のPCNAのcDNAをクロン化しその抗体を得て、受精によるS期開始機構を解析した。その結果、PCNAは成熟未受精卵においてもすでに核内に局在しているが可溶性であり、受精するとDNAに結合するようになると判明した。このPCNAの核内局在の調節は受精によるS期開始の鍵と考えられ、現在その分子機構を検討中である。

Usually, the somatic cell cycle is alternating between M and S phases, and the meiosis is alternating between M and S phases. The regulation mechanism of the start of S phase in egg cells is different from that of M phase and S phase, and the common mechanism of M phase and S phase is different from that of S phase. 1. meiotic cycle: origin of egg extracts, acellular line, meiotic cycle reproduction, meiotic cycling extracts development, analysis The result is that there is no cell line, and the egg extract is expected to be identified during meiosis. During meiosis, S phase inhibition is caused by Mos-MAP protein, MAPKKK protein, and S phase inhibition is caused by MAPKKK protein, MAPKKK protein, and MAPKKK protein. Now, the active form of MAPK-γ-S is controlled, and the downstream of Mos is MAP. 2. Start of S phase during fertilization: cDNA of PCNA in egg was detected by PCR and antibody was detected. The result is that PCNA is soluble in the nucleus and fertilized in the cytoplasm. The regulation of PCNA in the nucleus is the key to the initiation of fertilization and the molecular mechanism of PCNA in the present.