無細胞系における収縮環の形成とその分子機構の解析

无细胞系统中收缩环的形成及其分子机制分析

• 批准号: 08259204
• 负责人: 岸本 健雄
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08259204/
• 关键词: 細胞質分裂; 収縮環形成; 細胞周期; M期; cdc2キナーゼ; Rho; 低分子量G蛋白質; アフリカツメガエル卵無細胞系

本研究の目的は、全真核細胞に共通してM期の全てをcdc2キセナーゼが統御していることに着目し、細胞質分裂における収縮環の形成機構をM期の進行との関連から解明することにある。本年度は、以下の成果を得た。1.Rho蛋白質:収縮環の形成にあたって、Rhoが分子スイッチとして機能していることが判明しつつある。そこで、細胞周期の進行に応じて、収縮環の形成されるM期の終期特異的にRhoの活性が変化するのかどうかを確かめることを試みた。このために、アフリカツメガエル卵抽出物由来の無細胞系で細胞周期を進行させることができる“cycling extracts"を活用した。大腸菌に産生させたGST-Rhoをcycling extractsに加え、RhoのGDP結合型とGTP結合型との間の転換をもたらす活性の変化を細胞周期の進行に応じて追跡したところ、M期に応じたRhoの活性化を検出することができた。現在、膜分画へ取り込まれるように修飾を受けることができるRhoをバキュロウイルスで産生して、Rhoの活性変化の検出を再確認中である。今後は、cdc2キナーゼからRhoに至る経路の解析に向かいたい。2.無細胞系における収縮環形成の試み:ヒトデ卵から単離した表層をカバーグラスに付着させ、これに上述のアフリカツメガエル卵cycling extractsおよび単離分裂装置を加えるこにより、M期終了時に収縮環様のアクチンフィラメント束を無細胞系で形成しうるかを、現在検討中である。

は の purpose, this study all eukaryotic cells に common し て M phase の full て を cdc2 キ セ ナ ー ゼ が governing し て い る こ と に mesh し, cytoplasmic division に お け る の 収 shrinkage ring forming organization を M period の と の masato even か ら interpret す る こ と に あ る. For the current year, た and the following を achievements を obtained た. 1. Rho protein: 収 shrinkage ring の form に あ た っ て, Rho が molecular ス イ ッ チ と し て function し て い る こ と が.at し つ つ あ る. そ こ で, cell cycle の に 応 じ て, 収 shrinkage ring の form さ れ る stage M の eventually specific に Rho が の activity - the す る の か ど う か を か indeed め る こ と を try み た. こ の た め に, ア フ リ カ ツ メ ガ エ ル eggs extract で origin の no cell line cell cycle を さ せ る こ と が で き る "cycling extracts" を use し た. Coliform に produce さ せ た GST - Rho を cycling extracts に え, Rho の type combined GDP と GTP type combined と made between の の planning in を も た ら の す activity - the を cell cycle の に 応 じ て tracing し た と こ ろ, M phase に 応 じ た Rho の activeness を 検 out す る こ と が で き た. Now, membrane points draw へ り 込 ま れ る よ う に modified を by け る こ と が で き る Rho を バ キ ュ ロ ウ イ ル ス で produce し て, Rho の activity - the の 検 from を reconfirm で あ る. In the future, the <s:1>, cdc2キナ, ゼ, ら, Rhoに to る routes will be used for <s:1> analysis of に towards に, た and た. 2. No cell line に お け る 収 shrinkage ring forming の try み : ヒ ト デ eggs か ら 単 from し た surface を カ バ ー グ ラ ス に pay the さ せ, こ れ に above の ア フ リ カ ツ メ ガ エ ル cycling Extracts お よ び 単 from splitting device を plus え る こ に よ り, M when the final に 収 shrinkage ring others の ア ク チ ン フ ィ ラ メ ン ト で を no cell line beam forming し う る か を, now 検 please で あ る.

项目成果

岸本健雄: "生物学辞典 第4版(分担)" 岩波書店, 2027 (1996)

岸本武夫：《生物学词典第4版（共享）》岩波书店，2027（1996）

岸本健雄: "Cdc2キナーゼはどのようにしてM期を実現するのか" 蛋白質・核酸・酵素. 41. 1839-1846 (1996)

Takeo Kishimoto：“Cdc2 激酶如何实现 M 期？”41. 1839-1846 (1996)

Okumura,E.,et al.: "Initial triggering of M-phase in starfish...." J.Cell.Biol.132. 125-135 (1996)

Okumura,E.,et al.：“海星 M 相的初始触发......”J.Cell.Biol.132。

Honma,N.,et al.: "Two types of apoptotic cell death of rat...." J.Neurochem.67. 1856-1865 (1996)

Honma,N.,et al.：“大鼠细胞凋亡的两种类型......”J.Neurochem.67。

岸本健雄: "英語論文セミナー「現代の細胞生物学」(分担)" 講談社, 168 (1996)

岸本武雄：《英语论文研讨会‘现代细胞生物学’（合着）》讲谈社，168（1996）