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G1サイクリンによるS期移行制御の分子機構

G1细胞周期蛋白控制S相变的分子机制

基本信息

批准号：
05269211
负责人：
岸本健雄
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は、G1サイクリン・cdk複合体を手掛りとして、初期胚におけるS期制御の機構を、M期とS期のcouplingという視点から明らかにすることである。本年度に得られた成果は以下の通りである。1.減数分裂間期では、M期が終了したあとS期を経ずに再びM期へ進行する。アフリカツメガエル減数分裂間期卵をpuromycin処理したところ、間期の核が形成されてDNA複製がおこると判明した。このことは、減数分裂間期には既にDNA複製能は備わっているが、それを抑えるシステムが蛋白質合成依存性に存在している可能性を示唆している。2.減数分裂を完了した成熟卵では、M期が終了しているにもかかわらず、受精の刺激なしにはS期が始まらない。ところがこうしたヒトデやウニの成熟未受精卵では、emetine等で蛋白質合成を抑えると、それだけで受精の刺激なしにDNA複製が開始すると判明した。このことは、上記の1とあわせて、S期開始の抑制因子が蛋白質合成に依存して存在していることを示唆している。正常の受精の場合は、この抑制因子がG1サイクリン・cdkの作用の下流にあって不活化されて、S期が始まると考えられる。3.胞胚期にはG1期が出現してM期とS期のcouplingが成立する(中期胞胚転移,MBT)とされている。アフリカツメガエル卵細胞からはじめてサイクリンD1、D2のcDNAをクロン化し、サイクリンD2特異的な抗体を作製した。これによる解析の結果、サイクリンD2蛋白質は未受精卵には存在しないが、受精後その量は初期発生に応じて増加し、胞胚期にピークに達したあと減少すると判明した。このサイクリンD2蛋白質量のピーク期とMBTとは一致するので、両者の因果関係を現在解析中である。

The purpose of this study is to study the mechanism of G1-cdk complex, the mechanism of S-phase control, the coupling of M-phase control and S-phase control. This year's achievements are as follows: 1. The meiotic interphase ends and the S phase begins. Interphase puromycin processing, interphase nuclear formation, DNA replication The possibility of protein synthesis dependence exists in meiosis. 2. Meiosis is complete, mature egg is complete, M phase is complete, fertilization is stimulated, S phase is initiated To determine whether mature, unfertilized eggs are inhibited from protein synthesis, or stimulated by fertilization, DNA replication, etc. The inhibitor of protein synthesis depends on the existence of protein. Under normal fertilization conditions, the inhibitory factors of G1 and CDK are not activated, and S phase is initiated. 3. The coupling between M and S phases is established when embryo stage changes from G1 to MBT. The cDNA of D1 and D2 is used to produce antibodies specific to D2. The results of this analysis showed that D2 protein was present in unfertilized eggs, increased in the early stages of development and decreased in the embryo stage. The relationship between protein content and MBT was analyzed.