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サイクリン・cdk複合体の核移行の分子機構

细胞周期蛋白/CDK复合物核转位的分子机制

基本信息

批准号：
06248209
负责人：
岸本健雄
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

サイクリンB・cdc2複合体(cycB・cdc2)は、全真核細胞に共通のM期誘起蛋白質キナーゼである。ヒトデ未成熟卵ではcycB・cdc2は不活性型前駆体として細胞質中の不溶性画分にアンカーしているが、活性型への転換に際して可溶性画分に遊離されて核移行することを見出している。そこで本年度は、この活性型への転換と可溶化との関連、およびその後の核移行について解析し、以下の成果を得た。1.cycB・cdc2の活性化因子はcdc25フォスファターゼである。その不活性型と活性型について、それぞれを抗cdc25抗体カラムを用いて、ヒトデ卵から精製した。2.ヒトデ未成熟卵から不溶性画分を得、それにcdc25フォスファターゼを作用させて、cycB・cdc2の遊離を検討した。この際、cdc25フォスファターゼの活性を阻害するバナジン酸の効果もあわせて検討した。その結果、cycB・cdc2の遊離のためには、cdc25フォスファターゼは活性型である必要があるが、フォスファターゼ活性そのものは必要としないと判明した。3.遊離したcycB・cdc2がそのあと核内に移行するにはそのキナーゼ活性が必要であることが、cdc2キナーゼの作用の阻害剤であるブチルラクトンIを用いて判明した。しかしこのキナーゼ作用の標的は、cycB・cdc2複合体内におけるサイクリンBの自己リン酸化ではなく、細胞質中の他の因子であるとみなされ、その実体を現在解析中である。以上の結果から、cycB・cdc2の核移行は、活性型cdc25フォスファターゼに依存した不溶性画分からの遊離と、その後の自身のキナーゼ活性に依存した実際の核への移行との2段階からなるといえる。これらにより、核移行のタイミングをM期開始時特異的に規定していると考えられる。

E. coli B ·cdc2 complex (cycB ·cdc2) and eukaryotic "cells" share the same M-phase proteins. Immature eggs, cycB ·cdc2, insoluble progenitor cells, insoluble precursors, active precursors, immature eggs, inactive precursors, insoluble precursors, The following is the result of nuclear transfer in the current year, in the active type, in the soluble form, in the nuclear transfer process and in the following. 1.cycB ·cdc2 "activating factor" cdc25 activity factor "activation factor". The inactive type, the active type, the anti-cdc25 antibody, the anti-DNA antibody, the sperm antibody, the egg antibody, the sperm antibody, the egg antibody, the sperm antibody, the sperm antibody two。 Immature eggs are insoluble, cdc25 eggs are insoluble, and cycB cdc2 eggs are isolated from each other. The international, cdc25 and environmental protection measures are used to prevent the loss of acid. The results showed that cycB, cdc2, cdc25, active, active, 3. CycB ·cdc2