Ras癌遺伝子産物を標的とした細胞増殖制御に関する基礎的研究-ファルネシルトランスフェラーゼ発現とその抑制

Ras癌基因产物——法尼基转移酶表达及其抑制的细胞生长调控基础研究

• 批准号: 07274240
• 负责人: 河田 純男
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07274240/
• 关键词: ras癌遺伝子産物; フェルネシルトランスフェラーゼ; ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤; 細胞増殖

ファルネシルトランスフェラーゼ活性測定には従来より精製Ras淡白と^3Hラベルされたピロ燐酸ファルネシルを基質として用いた測定法が使用されてきた。しかし、従来の測定法では臨床材料などを用いた場合、検体試料の蛋白増加によりバックグラウンドのカウントが上昇するため、正確な測定が不可能であった。本研究では、ダブシル基にてラベルしたRas C末端ペプチドを用いたHPLCによる本酵素活性測定法を開発した。本法は、臨床材料などの粗精製の検体においても有用な測定法であると考えられる。ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤(manumycin gliotoxin)は十種類のヒト癌由来細胞株の増殖を抑制した。Ras p21のファルネシル化抑制率と増殖抑制率はほぼ並行しており、とくにRas癌遺伝子の活性化された細胞株において著効を示した。ヒト膵癌由来細胞PaCa-2をBALB/cヌードマウスの皮下に移植し、本阻害剤の抗腫瘍効果を検討したところ、有意の抗腫瘍効果を観察した。本研究によって、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤はin vitroおよびin vivoにおいて抗腫瘍効果を示すことが明らかとなった。また、Ras癌遺伝子が活性化されている癌細胞においてより強い増殖抑制作用を示した。これらのことから、Ras癌遺伝子の活性化を有する大腸癌や膵癌の治療法として本法が有用である可能性が示唆される。今後、臨床応用にむけてのさらなる検討が必要である。

フ ァ ル ネ シ ル ト ラ ン ス フ ェ ラ ー ゼ activity determination に は 従 to よ り refined Ras pale white と ^ 3 h ラ ベ ル さ れ た ピ ロ 燐 acid フ ァ ル ネ シ ル を matrix と し て in い た measurement が use さ れ て き た. し か し, 従 の measurement で は clinical material な ど を with い た occasions, 検 sample の protein raised plus に よ り バ ッ ク グ ラ ウ ン ド の カ ウ ン ト が rise す る た め, correct determination of な が impossible で あ っ た. This study で は, ダ ブ シ ル base に て ラ ベ ル し た Ras C terminal ペ プ チ ド を with い た HPLC に よ る this enzyme activity determination method を open 発 し た. This method and clinical materials な <s:1> crude and refined <s:1> 検 bodies にお て て <e:1> were examined by な determination method であると. フ ァ ル ネ シ ル ト ラ ン ス フ ェ ラ ー ゼ resistance against tonic (manumycin gliotoxin) は ten kinds の ヒ origin ト carcinoma cell lines の raised colonization を inhibit し た. Ras p21 の フ ァ ル ネ シ ル chemical inhibition rate と raised colonization inhibition rate は ほ ぼ parallel し て お り, と く に Ras carcinoma heritage 伝 son の activeness さ れ た cell lines に お い て the unseen を shown し た. ヒ ト PaCa origin Cui carcinoma cells - 2 を BALB/c ヌ ー ド マ ウ ス の subcutaneous し に transplantation, the resistance against tonic の resistance swollen sores unseen fruit を beg し 検 た と こ ろ, intentionally の resistance swollen sores unseen fruit を 観 examine し た. This study に よ っ て, フ ァ ル ネ シ ル ト ラ ン ス フ ェ ラ ー ゼ resistance against tonic は in vitro お よ び in vivo に お い て resistance swollen sores unseen fruit を shown す こ と が Ming ら か と な っ た. ま た, Ras cancer but 伝 が activeness さ れ て い る cancer に お い て よ り strong inhibition を い raised colonization in し た. こ れ ら の こ と か ら, Ras cancer but 伝 の activeness を have す る colorectal cancer や の Cui cancer therapy と し て in が useful で あ が る possibility in stopping さ れ る. In the future, clinical 応 will use にむけて にむけて さらなる検 さらなる検 to discuss が necessity である.

项目成果

T.Ito, S. Kawata, et al.: "Suppression of human pancreatic cancer growth in BALB/C nude mice by marumycin, a farnesyl: protein transferase inhibitor." Jpn.J.Cancer Res.in press. (1996)

T.Ito、S. Kawata 等人：“marumycin（一种法尼基蛋白转移酶抑制剂）对 BALB/C 裸鼠中人胰腺癌生长的抑制作用。”

T.Nagase, S.Kawata, et al.: "Inhibition of cell growth of human hepatoma cell line (Hep G_2)by a fanesyl: transferase inhibitor." Int.J.Cancer. in press. (1996)

T.Nagase、S.Kawata 等人：“法尼基：转移酶抑制剂对人肝癌细胞系 (Hep G_2) 细胞生长的抑制。”

H,Ishiguro, S.Kawata, et al.: "High-performarce liquid chromatographic assay for farnesyl: protein transterase ac tirity with dabsylated peptide.-" J.Chromatogr.B. 663. 35-42 (1995)

H,Ishiguro, S.Kawata, et al.：“法尼基的高效液相色谱测定：使用 dabsylated 肽进行蛋白质转移酶活性测定。-”J.Chromatogr.B.

河田純男: "血清脂質。ファーネシルピロホスフェイト。" The Lipid. 6. 73-81 (1995)

Sumio Kawata：“血清脂质。法尼基焦磷酸盐。”脂质 6. 73-81 (1995)