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運動ニューロンのidentityを反映する分子群探索

寻找反映运动神经元身份的分子群

基本信息

批准号：
10220206
负责人：
田中英明
金额：
$ 34.3万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

運動ニューロンのidentityを反映する分子的実体を明らかにするため、我々は分泌あるいは膜結合型蛋白質に存在するシグナルシークエンスを持ち、且つ運動ニューロンサブタイプに選択的に発現されるcDNAを探索するためシグナルシークエンストラップ法を遂行した。その結果、発生初期胚の運動ニューロンに選択的に発現されている新規膜蛋白質10B4と273分子を見出した。これらの分子には、分子構造として蛋白質間の結合活性を持つロイシンリッチリピートが細胞外領域に存在するため、その細胞外領域とアルカリフォスファターゼとの融合蛋白質を作成し、ニワトリ胚での結合相手を探索したが選択的に結合する組織や細胞は見いだせず、両分子共に可溶性分子と結合する受容体としての機能を持つと推察された。実際、273は細胞質内領域のチロシン残基がリン酸化されていた。モノクローナル抗体を作製した免疫組織化学の解析から、273分子は運動ニューロン軸索が伸展し始める時期には細胞体と軸索双方に発現していたが、筋との結合が形成され始めるE6以降では細胞体の発現は消失していき、軸索には孵化するE21近くまで発現が持続した。これらのことから、筋やシュワン細胞からの何らかの因子を受容しているのではないかと想定された。これらの分子の機能を明らかにするために、電気穿孔法によるニワトリ胚内への遺伝子導入による過剰発現やsiRNAによる機能阻害を試みてきたが、これまでのところ、明確な機能を見いだせていない。しかし、10B4分子は2004年3月号のNature NeuroscienceにNogo-66/p75受容体コンプレックスと協同的に働く分子として報告されたLINGO-1と同じ分子であった。今後は、273と10B4分子の発生過程における機能を解明していく研究を継続する予定である。

The identity system reflects the molecular weight of the molecule, and we secrete the protein that combines the membrane of the molecule. The combination of the membrane protein and the protein is present in the system, and the cDNA is selected in the system. The results showed that the new membrane protein 10B4 273 molecule was detected in the early stage of embryo development. Molecular cloning, molecular engineering, protein binding activity, extracellular domain, extracellular domain. The molecular co-soluble molecule is combined with the capacitive receptor and the mechanism can maintain the ability to detect the target. The internal domain of 273 carbon dioxide was acidified and the residue was acidified. The immuno-histochemical assay and 273 molecular kinetic assay were used to analyze the immuno-histochemistry and 273 molecular kinesis. the two sides of the cell body were linked together to form a sequence E6 in order to reduce the disappearance of the cell body and the incubation of the cell body to E21. I don't know what to do. I don't know. I don't know. I don't know what to do. The molecular machine can demonstrate that the siRNA machine can prevent the transmission of electricity from the embryo by using the method of electrical punch. It is shown that the machine can prevent the machine from causing damage to the machine. The report of "Nature Neuroscience", "Nogo-66/p75 receptor" in March 2004, "LINGO-1" and "molecule" in coordination with "LINGO-1" and "molecule". In the future, 273-year-old 10B4 molecular students will be able to understand how much research is expected to happen.