酵母ゲノム染色体におけるクロマチンの機能構造と転写調節機構

酵母基因组染色体染色质的功能结构和转录调控

• 批准号: 07282217
• 负责人: 清水 光弘
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Tokyo University of Pharmacy and Life Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07282217/
• 关键词: クロマチン; ヌクレオソーム; 転写制御; 転写因子; DNAの高次構造; 酵母

1.Zinc-finger蛋白質Rmelpによる遠隔的な転写抑制機構IME1(Inducer of Meiosis)は,S.cerevisiaeの減数分裂の開始を制御するマスター遺伝子であり,Rmelp(Repressor of Meiosis)は,一倍体細胞においてIME1の転写を抑えることによって減数分裂開始を阻害している.Rmelpによる転写抑制機構を明らかにするために,IME1,RME1の変異株を用いて,酵母ゲノムIME1遺伝子上流をin vivofootprint法によって解析した.その結果,1)ゲノムのIME1上流における-2030と-1950の2つのRmelpの結合部位は,IME1の転写抑制,胞子形成阻害に必要である,2)ヌクレオソームがポジショニングすることによって2つのRmelpの結合部位が空間的に近くに配置される,3)CYC1プロモーターにおいて,Rmelpは約300〜400bp離れた部位からactivatorsの結合を阻害する,4)Rmelpによるactivatorsの結合阻害及び転写抑制には,グローバルな転写因子Rgr1pとSin4pが必要である,などを明らかにした.以上のことから,Rme1pはRgr1p,Sin4pと協同して,転写不活性なクロマチンドメインを構築する,というモデルを提唱した.2.クロマチンの構築におけるDNAの高次構造の役割ヌクレオソームの形成・排除におけるDNAの高次構造の役割を明らかにするために,ヌクレオソームの中央またはリンカー部位に様々なnon-B型DNA配列を挿入し,in vivoでのヌクレオソーム形成に及ぼす影響について解析した.その結果,d(A)n・d(T)n,d(G)n,d(C)n,d(CG)n配列はヌクレオソームを破壊すること,またd(GA)n,d(AT)n配列はヌクレオソームのポジショニングに大きな影響を及ぼすことを明らかにした.

1。锌指蛋白RMELP的远程转录抑制机制是控制酿酒酵母中减数分裂起始的主基因，而rmELP（减数分裂的抑制剂）抑制了减数分裂的起始，通过抑制单倍体细胞中IME1的转录。为了阐明RMELP的转录抑制机制，使用IME1和RME1突变体诱导酵母基因组IME1基因的上游一侧。分析是通过Vivofootprint方法进行的。结果表明，1）基因组上游的两个RMELP结合位点-2030和-1950在转录抑制和抑制IMEE的孢子形成需要核小体的定位，导致两个RMELP位点的结合在空间上与cilc1促进剂相结合。 RMELP的Activatoma。 RS结合抑制和转录抑制需要全局转录因子RGR1P和SIN4P。从这些原因中，我们提出了一个模型，其中RME1P与RGR1P和SIN4P合作以构建转录无活跃的染色质结构域2。 DNA结构在染色质构建中的作用，以阐明DNA结构在形成和排除核小体中的作用，将各种非B型DNA序列插入到核小体的中心或接头位点中。分析了体内核小体形成的影响。结果表明，d（a）n・d（t）n，d（g）n，d（c）n，d（cg）n序列破坏核小体，而d（ga）n，d（at）n序列对核小体定位具有重大影响。