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核小体のG2-M期移行における代謝と動態のユビキチン系による制御

泛素系统对核仁 G2-M 相变过程中代谢和动力学的调节

基本信息

批准号：
07282220
负责人：
瀬野悍二
金额：
$ 1.28万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ユビキチン活性化酵素の温度感受性変異株ts85は制限温度下細胞周期G2期に停止し、核小体が形態異常を引き起こした。本変異株のユニークな表現型を利用して核小体の代謝異常の分子機序とG2期停止を引き起こす事との因果関係の解析を試みた。核小体異常はG2期停止細胞に特異的であることを、細胞を予めG2あるいはS期に同調してから非許容温度培養する実験で示した。Cdc2キナーゼの温度感受性変異株tsFT210も非許容温度下G2期に停止するが、核小体異常はみられない。核小体異常の典型はド-ナッツあるいは馬蹄型への変形で、その中央領域に観察される星雲状の高電子密度粒子(70nm)領域にプロテアソーム、誘導型HSP70およびポリユビキチン化蛋白質が免疫細胞化学的に一致した。また。ポリユビキチン化蛋白質は免疫電子顕微鏡によっても同粒子と一致した。ちなみに、プロテアソームが核小体に集結する観察は初めてである。G2期停止後許容温度に戻してM期へ進行させたところ、M期に入ると直ちに起こる核小体の消失過程が阻害され、metaphaseにおいてNORが互いに癒着したままと解釈できる異常染色体像がみられた。70nm粒子の実態の解明が残された課題である。

The temperature-sensitive strain ts85 of the ユビキチンactivating enzyme is stopped at the limiting temperature in the G2 phase of the cell cycle and causes abnormal nucleosome morphology. The phenotype of the heterogeneous strain is analyzed by analyzing the molecular mechanism of abnormal metabolism of nucleosomes and stopping the G2 phase, and analyzing the cause and effect relationship. Abnormal nucleosomes are used to stop cells in the G2 phase and are specific to the cells. The cells are in the G2 phase and the cells are synchronized to the S phase. The cells are cultured at non-permissive temperatures. The Cdc2 キナーゼの temperature-sensitive mutant strain tsFT210 shows G2 phase arrest at non-permissible temperatures and abnormal nucleosomes. Nucleosome abnormality is a typical はド-ナッツあるいは horseshoe-shaped への変-shaped で, そのcentral area に観看されるnebula-like のhigh electron density particle ( 70nm) field にプロテアソーム, inducible HSP70 およびポリユビキチンがimmunocytochemistry of the same にした.また. The ポリユビキチンprotein and immunoelectron microscopy are the same as the particles.ちなみに、プロテアソームがnuclear body にassemble する観看は初めてである. After the G2 phase is stopped, the allowable temperature is the same as the progress of the M phase, and the process of the disappearance of the nucleosome during the M phase Harm され、metaphase においてNORが Mutual いに heals したままと解釈できるAbnormal chromosomes look like がみられた. The solution to the problem of the state of 70nm particles is the problem.