ユビキチンサイクルが支配するがん細胞の増殖と染色体不安定化

泛素循环控制的癌细胞增殖和染色体不稳定性

基本信息

  • 批准号:
    04151062
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 9.28万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Cancer Research
  • 财政年份:
    1992
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1992 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

1.マウスFM3A細胞より分離したユビキチン活性化酵素E1温度感受性変異株の変異点の決定:マウスE1の完全長cDNAをクローン化し、全塩基配列を決定した。11株のE1変異株について変異点をRNA-PCRによって決定したところ、(イ)全てcoding領域、しかもヒト、マウス、コムギ、出芽酵母間で共通アミノ酸である部位が変わっていた。また、(ロ)変異点はE1蛋白質のC末端側半分の領域に集中していた。2.変異E1とE2分子種との相互認識の変化の解析:S期進行に異常をもつE1変異株を用いてS期に必須な蛋白質のユビキチン化を仲介すると思われるE2分子種を、非許容温度におけるE1からE2への標識ユビキチンの転送反応の低下としてみつけた。そのクローン化が急がれる。3.E1酵素のリン酸化による活性調節の検討:E1mRNA量は細胞周期で変動が見られなかった。一方、大腸菌で発現したマウスE1はcdc2キナーゼによってin vitroでリン酸化され、活性は2倍以上に増加した。また、in vivoでE1のリン酸化を確認した。4.サイクリンのユビキチン化と細胞周期との関係:大腸菌で発現され精製したヒトサイクリンBのユビキチン結合を精製したE1とE2を用いて検討したが、明瞭な結合を確認できなかった。このことは、サイクリンBがcdc2キナーゼと結合状態のときのみユビキチン化される可件性を示す。5.姉妹染色分体交換(SCE)遺伝子の同定:CHO細胞から分離した高頻度SCE温度感受性変異株の変異を相補するヒト遺伝子をクローン化し構造決定したところ、RNAポリメラーゼIIのlargest subunitと同定された。その因果関係についての検討が急がれる。
1. マ ウ ス FM3A cells よ り separation し た ユ ビ キ チ ン active phenoloxidase E1 temperature sensitivity - different strains の - different の decision: マ ウ ス E1 の completely long cDNA を ク ロ ー ン し, salt base full column を decided し た. 11 strains の E1 - different strains に つ い て - different を RNA - PCR に よ っ て decided し た と こ ろ, (イ) all て coding field, し か も ヒ ト, マ ウ ス, コ ム ギ, budding yeast で overlap among ア ミ ノ acid で あ が る parts - わ っ て い た. Youdaoplaceholder0, (ロ) variation point ロ E1 protein <s:1> c-terminal side half <s:1> domain に concentrated て て た た た. 2. - different E1 と E2 molecules of と の mutual understanding の variations change の analytic: S period of abnormal に を も つ E1 - different strains を with い て S period に must な protein の ユ ビ キ チ ン change を placement す る と think わ れ る E2 molecular を, the allowable temperature に お け る E1 か ら E2 へ の logo ユ ビ キ チ ン の planning to send the 応 の low と し て み つ け た. Youdaoplaceholder0 そ ロ ロ ロ ロ esterification が urgent がれる. 3.E1 enzyme <s:1> リ <s:1> acidification による activity regulation <s:1> 検 discussion: e1 mrna quantity cell cycle で changes が can be found in られな った. Party, coliform で 発 now し た マ ウ ス E1 は cdc2 キ ナ ー ゼ に よ っ て in vitro で リ ン acidification さ れ, active は に raised for more than 2 times add し た. Youdaoplaceholder0, in vivoでE1 <s:1> リ リ acidification を confirmation リ た. 4. サ イ ク リ ン の ユ ビ キ チ ン change と cell cycle と の masato: coliform で 発 now さ れ refined し た ヒ ト サ イ ク リ ン B の ユ ビ キ チ ン combined を し た E1 と E2 を with い て beg し 検 た が, clear な combining を confirm で き な か っ た. こ の こ と は, サ イ ク リ ン B が cdc2 キ ナ ー ゼ と combining state の と き の み ユ ビ キ チ ン change さ れ る す を a sex. 5. And sisters chromatid exchange (SCE) posthumous son 伝 の with: CHO cells か ら separation し た high frequency SCE temperature sensitivity - different strains の - different fill を phase す る ヒ ト posthumous son 伝 を ク ロ ー ン change し structure decision し た と こ ろ, RNA ポ リ メ ラ ー ゼ II の largest subunit と with fixed さ れ た. Youdaoplaceholder0 そ causal relationship に 検 て て 検 seek が urgent がれる.

项目成果

期刊论文数量(6)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Imai,N.: "Cloning and sequence of a functionally active cDNA for mouse ubiqeitin-activating enzyme E1" Gene. 118. 279-282 (1992)
Imai,N.:“小鼠泛素​​激活酶 E1 的功能活性 cDNA 的克隆和序列”基因。
  • DOI:
  • 发表时间:
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    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Kusubata,M.: "p13^<suc1> suppresses the catalytic function of p34^<cdc2> kinase for intermediate filament proteins, in vitro" J.Biol.Chem.267. 20937-20942 (1992)
Kusubata,M.:“p13^<suc1> 抑制 p34^<cdc2> 激酶对中间丝蛋白的催化功能,体外”J.Biol.Chem.267。
  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Takahashi,E.-i.: "The human ubiquitin-activating enzyme E1 gene(UBE1)mapped to band Xp11.23-p11.3by fluorescence in site hybridization" Cytogenet.Cell Genet.59. 268-269 (1992)
Takahashi,E.-i.:“通过荧光位点杂交将人类泛素激活酶 E1 基因 (UBE1) 定位到 Xp11.23-p11.3 条带”Cytogenet.Cell Genet.59。
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    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Yasuda,H.: "Cyclin dependent kinase (cdk2) in the murine cdc2 kinase ts mutant" Somat.Cell Mol.Genet.18. 403-408 (1992)
Yasuda,H.:“鼠 cdc2 激酶 ts 突变体中的细胞周期蛋白依赖性激酶 (cdk2)”Somat.Cell Mol.Genet.18。
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    0
  • 作者:
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Ayusawa,D.: "Complementation by a cloned human ubiquitin-activating enzyme E1 of the S-phase-arrested mouse FM3A cell mutant with thermolabile E1" Cell Struct.Funct.17. 113-122 (1992)
Ayusawa,D.:“S 期停滞的小鼠 FM3A 细胞突变体的克隆人泛素激活酶 E1 与不耐热 E1 的互补”Cell Struct.Funct.17。
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知道了