細胞を異常増殖と癌形質発現に導く分子機構の体細胞変異株を用いた研究

利用体细胞突变体研究导致细胞异常增殖和癌性表达的分子机制

• 批准号: 61010085
• 负责人: 瀬野 悍二
• 金额: $ 9.98万
• 依托单位: Research Institute for Clinical Oncology, Saitama Cancer Center
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1984
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1984 至 1986
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61010085/
• 关键词: 突然変異株; 哺乳類細胞; 遺伝子クローン化; 細胞周期; ヒト遺伝子; 増殖因子; 分化; 染色体異常; 染色体凝縮; 遺伝子移入; 脂質代謝; DNAポリメラーゼアルファ; チミジル酸合成酵素; 姉妹染色分体交換; 遺伝子発現

細胞増殖において染色体DNAが複製を完了した後正しく娘細胞に分配される際、染色体凝縮は必須の反応である。この染色体凝縮の調節遺伝子を変異株の利用によってヒトDNAからクローン化し、さらに同cDNAをクローン化した。その結果、本遺伝子は421アミノ酸からなる蛋白質をコードし、約55アミノ酸を単位とする7回繰返し構造を含むユニークなものであった。同遺伝子座をヒト第1染色体に決定した。DNA複製の主役を担うDNAポリメラーゼαの温度感受性変異株を高温にさらすと、M期において高頻度の染色体異常及び姉妹染色分体交換が誘発された。このことは、DNA複製の阻害がDNA2重鎖切断を介して染色体の不安定性を引き起し細胞死につながることを明確に示す。ヒトチミジル酸合成酵素mRNAの5'側非翻訳領域は28塩基を基本単位とする3回反復構造からなり、3通りのstem-loopを形成しうる。本構造を改変し翻訳活性との対応をみたところ、上記stem-loop構造が翻訳を抑制することが示唆された。高温にさらすと染色体異常や姉妹染色分体交換を誘発する変異株を14株分離したが、同条件下に外来遺伝子を移入すると形質転換頻度が正常値より40-70倍高いもの、あるいは低いものがあった。この結果は、染色体不安定性が遺伝子組換えと関連することを示す。また、遺伝子組換えのin vitroの測定系の樹立に関し、基礎検定を終えた。ホスファチジルセリン(PS)要求変異株を分離しPSが細胞増殖に必須であること、PSはホスファチジルコリンを前駆体としてリン脂質・セリン交換酵素によって生合成されることを解明した。また、Sindbisウイルス感染に際してPSがウイルスとエンドソーム膜との融合過程に必須の膜成分であることを示唆した。

After the DNA copy of the chromosome is completed, the distribution of the mother cell is very important, and the chromosome coagulation must be reversed. Chromosomal coagulation is the same as that of cDNA. The chromosome clotting is similar to that of cDNA. The results show that the results of this test show that there are no significant differences in the results of this experiment. The results are as follows: the results show that the results show that there are no significant differences in the results of the results, the results are as follows: the results of the results, the results of the results, the results, the In the same way as the constellation, chromosome 1 is determined. DNA replicators were responsible for the temperature sensitivity of DNA, high temperature, high temperature, M phase, high degree of chromosome and sister chromatid. Clones, DNA copies, block DNA2, cut off chromosomes, determine the nature of chromosomes, induce cell death, cause cell death, cause cell death, and show clear signs of death. The acid synthesis enzyme mRNA 5'in the non-inverted field 28 base position has three reverse reactions, and the three-way stem-loop has formed the acid synthesis enzyme. This device changes the activity of reversing and reversing, and the stem-loop makes the reversal, inhibition, and instigation. Under the same conditions, 14 plants were separated from each other, and under the same conditions, the exotic seeds were moved into the body, the normal temperature was 40-70 times higher than that of the normal, and the low temperature was 40-70 times higher than that of the normal. The results showed that the subgroup of chromosomal instability was not stable, and the subgroup of chromosome instability was not stable. The in vitro of the system is determined by the system, and the system is determined by the system. It is required that the isolation of PS cell colonies by PS requires that the cell colonies must be isolated, and that PS cells must be separated from each other in the presence of lipozymes. In the process of membrane fusion, it is necessary to identify the components of the membrane in the process of membrane fusion. Sindbis is very important in the process of membrane fusion.