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種々のサイトカインのレクチン様活性とその生理的意義に関する研究

多种细胞因子的凝集素样活性及其生理意义的研究

基本信息

批准号：
08219240
负责人：
山下克子
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Sasaki Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

種々のサイトカインは、免疫系をはじめ、生体内の様々な生理機能を制御しているが、サイトカインの多機能発現には受容体以外の情報伝達機構があると考えられる。その候補の一つとしてサイトカインのレクチン様活性が注目され、我々は、これまでにTNF-α,β,IL-1βが少なくともGPIアンカーのマンノース-6ーリン酸を認識していることを示すデータを得てきた。本年は、〔^<35>S〕-メチオニン標識したリコンビナイトTNF-αおよびIL-1βを調製し、詳細な糖結合特異性を調べると共に、サイトカインに認識されるGPIアンカーグリカン鎖の構造解析を行った。TNF-αとIL-1β糖結合特異性の同定のために、プレートにコートしたヒト胎盤由来アルカリ性ホスファターゼ(ALP)と〔^<35>S〕-IL-1βあるいはTNF-αの結合に対する各種オリゴ糖の阻害実験を行った。その結果、マンノース-6ーリン酸及びそのジエステル体に同程度の強い阻害活性が見られた。さらに、キトビオース構造を認識するUDAややキトビオースでも弱い阻害活性を示すことから、TNF-αおよびIL-1βはGPIアンカーのマンノース-6ーリン酸を認識するレクチン様ペプチド部位(サブサイトA)のみならず、Manα1→4GlcNに弱い親和性を有するサブサイトBが存在することが示唆された。両サイトのレクチン様活性の加算性、加速性について合成糖鎖を用いて検討中である。一方、サイトカインのレクチン様活性のリガンドとしてのALPの糖鎖構造に関し興味ある知見を得た。ALPをβ-N-アセチルグルコサミン特異的PVLカラムにかけると、ALPはPVLカラムに結合して0.1M GlcNAcで溶出された。ついでβ-N-アセチルヘキソサミニダーゼ処理したALPはPVLカラムを素通りし、また、弱酸処理でもPVLカラムを素通りすることから、GlcNAcβ1-P残基がGPIグリカン部のいずれかのマンノシル残基に結合していることが判明した。この構造は哺乳類からデンキウナギのアセチルコリンエステラーゼまで広範囲に観察され、その生合成機構およびその生理的意義に興味が持たれる。

The immune system, the physiological function of the organism, the multifunctional development of the organism, and the information transmission mechanism outside the receptor. The activity of TNF-α,β,IL-1β and GPI-6 in the serum was detected by ELISA and the results showed that TNF-α,β,IL-1β and GPI-6 were detected by ELISA. This <35>year, the GPI was identified by TNF-α and IL-1β, and the structure analysis of GPI was performed. The specificity of TNF-α and IL-1β sugar binding is <35>constant, and the inhibition of TNF-α binding to various sugar receptors occurs in the placenta. As a result, the activity of the inhibitor was significantly higher than that of the inhibitor. UDA, TNF-α, IL-1β, GPI, and GPI structures are recognized as weak medium affinity sites (Servit A), Manα1, and 4GlcN. The additive and accelerating properties of the enzyme activity are discussed in the application of synthetic sugar chain. A party, a party ALP β-N-α-β-α-β-N-GlcNAc β1-P residues were identified as binding residues in the GPI region by β-N-GlcNAc β1-P treatment and weak acid treatment. This structure is interesting for mammals, for example, for their biological synthesis mechanisms and physiological significance.