心筋細胞の圧受容機序及び圧負荷によって活性化される細胞内情報伝達系の解析

心肌细胞压力感受机制及压力超负荷激活的细胞内信号转导系统分析

• 批准号: 08258208
• 负责人: 山崎 力
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08258208/
• 关键词: アンジオテンシンII; Raf-1キナーゼ; ERK; Src; Csk; Ras; 心筋細胞

我々の研究室ではこれまでに、心筋細胞に伸展負荷を加えるとAngII、エンドセリン1(ET-1)といった液性因子がオートクリンファクターとして働き、ERKの活性化、前癌遺伝子の発現に続いて心肥大が形成されることを明らかにした。しかし、ERK上流の細胞内情報伝達系には不明な点が依然多いため、このリン酸化酵素カスケードを詳細に解析した。方法として、ラット新生仔培養心筋細胞に、Ras及びRaf-1キナーゼのdominant negative mutant(D.N.Ras、D.N.Raf-1)あるいはSrcファミリーキナーゼの機能を抑えるC-terminal Src kinase(Csk)の遺伝子を、ERK遺伝子と同時に導入した。また、種々のリン酸化酵素阻害薬で前処理し、AngII刺激後のRaf-1キナーゼ及びERK活性を測定した。その結果、AngIIによるERKの活性化は、Csk、D.N.Rasの影響は受けなかったが、D.N.Raf-1の導入で完全に抑制された。一方、フォルボルエステルの24時間刺激またはカルフォスチンCによりPKCを抑制すると、AngIIによるRaf-1キナーゼ及びERKの活性化が完全に抑制された。しかし、チロシンキナーゼ阻害薬(チルフォスチン、ゲニスタイン)及びRas阻害薬(マニュマイシン)は、AngIIによるERKの活性化を全く抑制しなかった。以上より、心筋細胞におけるAngIIによる肥大反応は、PKCに続くRaf-1キナーゼ/ERK経路の活性化を引き起こすことによって生じることが判明し、Srcファミリーキナーゼを含むチロシンキナーゼ、Rasは関与していないことが示された。

In our laboratory, we found that the increase of stress on cardiac muscle cells, the increase of AngII, the increase of ET-1, the increase of ERK activity, the development of precancerous genes, and the formation of cardiac hypertrophy were related to the development of cardiac hypertrophy. The intracellular information system of ERK upstream is still unknown, and the enzyme system of ERK upstream is analyzed in detail. Methods: Ras and Raf-1 were introduced into cultured neonatal cardiac muscle cells simultaneously with C-terminal Src kinase(Csk) gene and ERK gene. Raf-1 and ERK activity were measured before and after AngII stimulation. As a result, the activation of ERK by AngII, Csk and D.N.Ras was completely inhibited by the introduction of D.N.Raf-1. The activation of PKC, Raf-1 and ERK was completely inhibited by 24-hour stimulation. The activation of ERK in AngII was completely inhibited by the inhibition of ERK and Ras. The above results show that the activation of the Raf-1/ERK pathway in the cardiac muscle cells is initiated by the activation of the AngII pathway, and the activation of the Ras pathway is initiated by the activation of the Raf-1/ERK pathway.

项目成果

Yamazaki T.et al: "Stretching the evidence in the case of cardiac growth." Cardiovasc.Res.31(4). 493-498 (1996)

Yamazaki T.et al：“在心脏生长的情况下扩展证据。”

Shiojima,I.et al: "Molecular aspects of mechamical stress-induced cardiac hypertrophy" New horizons for failing heart syndrome ed by Sasayama S. Springer Verlag., (1996)

Shiojima,I.et al：“机械应力诱导的心脏肥大的分子方面”，心力衰竭综合征的新视野，由 Sasayama S. Springer Verlag 编辑，(1996)

Yamazaki T.et al: "The renin-angiotensin system and caediac hypertrophy." Heart. Suppl.3. 33-35 (1996)

Yamazaki T.et al：“肾素-血管紧张素系统和胎儿肥大。”

Yamazaki T.et al: "AngiotensinII mediates mechanical stress-induced cardiac hypertrophy." Diabetes Res.Clin.Practice. 30(Supple). S107-S111 (1996)

Yamazaki T.et al：“血管紧张素 II 介导机械应激引起的心脏肥大。”

Yamazaki T.et al: "Molecular aspects of mechanical stress-induced cardiac hypertrophy." Mol.Cell.Biochem.163/164. 197-201 (1996)

Yamazaki T.et al：“机械应力引起的心脏肥大的分子方面。”