心筋梗塞に伴う心機能不全の発生機序の解明と新しい治療法の開発

阐明与心肌梗死相关的心功能障碍的机制并开发新的治疗方法

• 批准号: 07557054
• 负责人: 山崎 力
• 金额: $ 9.02万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07557054/
• 关键词: CSX; ホメオボックス; プロモーター; ANP; Engrailed; Csx; 心筋細胞; Msx2; ヒト染色体

心筋特異的ホメオボックス遺伝子Csxは、胎児期早期から心筋に発現し、また、そのノックアウトマウスで心臓の形成に異常が見られることから、心臓の発生・分化において極めて重要な転写因子であると考えられる。その転写機構を明らかにすることが心筋発生の解明につながり、心筋再生による新しい心筋梗塞の治療法に結び付くと考えられる。しかしながらCSX蛋白の機能に関しては、そのターゲット遺伝子も含めてほとんど知られていない。そこでCSX蛋白の転写因子としての機能の解析を試みた。ヒトCSXcDNAおよびそのdeletion mutantを発現vectorに組み込み、種々の心筋特異的遺伝子のプロモーター領域を含むreporter geneとともにCOS cellに導入し、CSXのtrans-activation活性を解析した。また、ショウジョウバエにおいて強力なtrans-repression活性をもつEngrailedとCSXのキメラ蛋白を作成し、CSXに対するdominant-negative効果を持つか否かについて検討した。その結果、心筋特異的遺伝子のうち、心房性Na利尿ペプチド(ANP)遺伝子がCSXによってその転写活性が亢進することが判明した。CSXのdeletion mutantの解析から、CSXホメオドメインの5'側にtrans-activation domainが、3'側にinhibitory domainが存在することが明らかになった。CSXのtrans-activation domainをEngrailedのpressor domainに置換したキメラ蛋白は、CSXのdominant-negative mutantとして機能することも明らかにされた。以上より、ANP遺伝子がCSXのターゲット遺伝子の1つである可能性が示唆され、また、CSX蛋白の機能ドメインも明らかになった。一方、Engrailed-CSXキメラ蛋白は、適切なプロモーターを用いてin vivoでoverexpressionすることによってconditional knockoutが可能になると考えられ、CSXの機能解析を行ううえで有用な手段の1つとなることが期待された。

The heart muscle specific gene Csx is found in the early fetal period, and the heart muscle is abnormal in the formation of the heart muscle. The mechanism of heart muscle regeneration and the treatment of heart muscle infarction CSX protein function is related to the function of CSX protein, and the function of CSX protein is related to CSX protein. The analysis of CSX protein expression factors and its function was studied. CSX cDNA deletion mutant detection vector contains reporter gene and COS cell introduction, CSX trans-activation activity analysis It is a powerful trans-repression activity. It is a dominant-negative effect of CSX. The results showed that the activity of CSX was increased by atrial natriuretic peptide (ANP) and cardiac muscle specific protein. CSX's deletion mutant analysis, CSX's 5'-side trans-activation domain and 3'-side inhibitor domain exist. CSX's trans-activation domain engages the pressure domain, and CSX's dominant-negative mutant functions. The above, ANP protein CSX protein gene expression of the possibility of 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 10, 11, 12, 10, 12, 13, 14, 15, 16, 18, 19, 10, One side, Engrailed-CSX

项目成果

Yamazaki T., Komuro I., Kudoh S. 他: "Mechanical Stress Activates Protein Kinase Cascade of Plosphorylation in Neoratal Rat Cardiac Myay" J. Clin. Invest.96. 438-446 (1995)

Yamazaki T.、Komuro I.、Kudoh S. 等人：“机械应激激活新生大鼠心脏 Myay 中的蛋白激酶级联”J. Clin Invest.96 (1995)。

Yamazaki T.et.al.: "The renin-angiotensin system and cardiac hypertrophy." Heart. Suppl.3. 33-35 (1996)

Yamazaki T.et.al.：“肾素-血管紧张素系统和心脏肥大。”

Yamazaki T.et al: "Molecular aspects of mechanical stress-induced cardiac hypertrophy and failure." New horizons for failing heart syndrome ed by Sasayama S Springer-Verlag, (1996)

Yamazaki T.et al：“机械应力引起的心脏肥大和衰竭的分子方面。”

Takano H., Komuro I,. Yamazaki T. 他: "Activation of p70S6 protein kinase is necessary for angiofensin II-induced hypertrophy in neonatal rot cardiac myocytes." FEBS leit.379. 255-259 (1996)

Takano H.、Komuro I、Yamazaki T. 等人：“p70S6 蛋白激酶的激活是血管芬素 II 诱导的新生儿腐烂心肌细胞肥大所必需的。” FEBS leit.379 (1996)。

Yamazaki T.et al: "Mechanical stretch activates the stress-activated protein kinases in cardiac myocytes." FASEB J.10(5). 631-636 (1996)

Yamazaki T.et al：“机械拉伸激活心肌细胞中的应激激活蛋白激酶。”