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変異c‐kit遺伝子導入によるドミナント・ネガティブ抗腫瘍効果の解析

引入突变c-kit基因显性失活抗肿瘤作用分析

基本信息

批准号：
08266238
负责人：
千葉勉
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08266238/
关键词：
c‐kit stem cell factor(SCF)ドミナント・ネガティブ効果変異c‐kit 胃癌

项目摘要

ヒト胃癌細胞ECC12はc‐kitとstem cell factor(SCF)を同時に発現しており、これによるオートクリン増殖がおこなわれている。一方GCIY細胞は、正常c‐kitと子分子c‐kitを発現しているが、SCFを投与しても、そのチロシン・リン酸化は見られず、また細胞増殖も促進されない。そこで、本細胞からc‐kitをクローニングしたところ、正常c‐kitと同時に、変異によりストップ・コドンとなった小分子c‐kitが得られた。本小分子c‐kitはチロジン・キナーゼ・ドメインのチロジン残基がストップ・コドンとなっており、したがってチロジン・リン酸化による二量体が生成されない可能性がある。これらのcDNAの全長を得、これを別々に、または同時にCOS細胞に導入したところ、正常c‐kitのみの導入細胞ではSCFによりc‐kitのチロシン・リン酸化がみられ、細胞増殖も促進されたが、小分子c‐kitのみの導入では変化はみられなかった。さらにこれらを同時に発現したCOS細胞では、SCFによるチロシン・リン酸ならびに増殖促進効果はc‐kitのみの導入細胞より著名に抑制されていた。以上より、小分子c‐kit遺伝子は、SCFと結合はするもののSCF受容体としてまったく機能していないと考えられた。さらに小分子c‐kitは正常c‐kitの作用を抑制するドミナント・ネガティブ効果をもつことが示された。以上の事実から、c‐kitを発現している癌に対して本小分子c‐kit遺伝子を用いることにり、遺伝子治療がおこなえる可能性が考えられた。

ヒトgastric cancer cell ECC12はc-kitとstem cell factor(SCF)に発成しており、これによるオートクリン Increase the reproduction of theがおこなわれている. GCIY cells, normal c-kit submolecules, c-kit molecule, SCFをInject しても, そのチロシン・リン acidification は见られず, またcell proliferation and promote されない.そこで、本cellからc-kitをクローニングしたところ、normal c-kitとAt the same time, the small molecule c-kit が got られた. This small molecule c-kit はチロジン・キナーゼ・ドメインのチロジン灌ストップ・コドンとなっており, したがってチロジン・リン acidification による binary body が generates されない possibility がある.これらのcDNAのfull-lengthを得、これを比々に、または Simultaneous introduction of COS cells into cells したところ、Normal c-kit のみの into cells ではSCFによりc-kitのチロシン・リン acidified がみられ, cell proliferation promotionされたが, small molecule c-kit のみの import では変化はみられなかった.さらにこれらをAt the same time, に発appears したCOS cell では, SCF によるチロシン・リン acid The effect of ならびにproliferation promotion はc-kit のみの is introduced into cells よりfamous にsuppression されていた. Above, the small molecule c-kit remains intact, and the SCF combined with the SCF acceptor has a functional function. The small molecule c-kit has the function of normal c-kit and inhibits the effect of c-kit. The above is a small molecule c-ki t缝子を用いることにり、缝子treatmentがおこなえる possibilityが考えられた.