造血幹細胞腫瘍白血病化の分子機構の解析

造血干细胞肿瘤向白血病转化的分子机制分析

基本信息

批准号：
08261204
负责人：
三谷絹子
金额：
$ 1.6万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08261204/
关键词：
骨髄異形成症候群 t(11;19)(q23;p13.1)MLL MEN 転写因子伸長因子

项目摘要

造血幹細胞腫瘍白血病化の分子機構の一端を明らかにする目的で進展期MDS症例に観察されるt(11;19)(q23;p13.1)の原因遺伝子MLL/MENの解析を行った。MLLはAT hooksと2つのzinc finger domainsを有する転写因子であり、t(11;19)転座の結果、2つのzinc finger domainsを失っている。一方、MENは849個のアミノ酸をコードする新規遺伝子であり、t(11;19)転座の結果、N末の45個のアミノ酸を失っている。その後、MENはRNAポリメラーゼII伸長因子をコードしていることが報告された(Shilatifard,A.,et al.,Science 271,1873-1876,1996)。私たちは、MLL/MEN、tMLL(患者白血病細胞で発現が期待される2つのzinc finger domains以下のシークエンスを失った短縮型のMLL)、MENのcDNAをCos7細胞に遺伝子導入し、それぞれ230kD,180kD,80kDの蛋白質として発現することを明らかにした。免疫組織染色及び細胞分画の実験により、これらの蛋白質はすべて主に核内に存在することが明らかになった。さらに、MENの生物学的機能を解析する目的でMEN及びlysine rich domainを欠いたMENの欠失変異体cDNAをRatl細胞に遺伝子導入した。この結果、MENはlysine rich domain依存性にRatl細胞のコロニー形成能を増強することが確認された。t(11;19)転座により形成されるMLL/MENは転写伸長因子の異常機能亢進により幹細胞腫瘍を白血化させる可能性があると考えられた。

为了阐明造血细胞肿瘤白血病的分子机制，我们分析了发育过程中MDS患者在MDS患者中观察到的致病基因MLL/男性，并且是病因MLL/MEN，这在发展中的MDS病例中观察到。 MLL是一个转录因子，具有AT钩和两个锌指域，导致T（11; 19）易位导致两个锌指域的损失。另一方面，男性是一个编码849个氨基酸的新基因，由于t（11; 19）易位，它在N末端失去了45个氨基酸。随后据报道，男性编码RNA聚合酶II伸长因子（Shilatifard，A。等，Science 271，1873-1876，1996）。我们已经揭示了MLL/MEN，TMLL（一种失去两个锌指的MLL，其预期在患者白血病细胞中表达的两个或更少的序列）和男性cDNA被转染到COS7细胞中，并分别表示为230KD，180KD和80KD的蛋白质。免疫组织学和细胞分馏实验表明，所有这些蛋白质主要存在于细胞核中。此外，为了分析男性的生物学功能，将缺乏男性和赖氨酸富含结构域的男性的缺失突变体cDNA转染到大鼠细胞中。结果，已经证实男性以富含赖氨酸富含域依赖性的方式增强了Ratl细胞的落形成能力。据认为，由于超模型转录伸长因子，T（11; 19）易位形成的MLL/男性可能导致白细胞生成细胞肿瘤。