12P13転座型白血病の分子機構の解析

12P13易位白血病分子机制分析

基本信息

批准号：
13218117
负责人：
三谷絹子
金额：
$ 26.24万
依托单位：
Dokkyo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

急性骨髄性白血病に観察されるinv(12)(p13q13)より3'-RACE法を用いて新規キメラ遺伝子TEL/PTPRRをクローニングした。得られたキメラcDNAはTEL遺伝子の第4エクソンにPTPRR遺伝子の第7エクソンが融合していた。PTPRRはTEL転座の相手遺伝子としては初めての受容体型チロシン・ホスファターゼ遺伝子であった。TEL/PTPRR遺伝子から転写されるmRNAには10種類のisoformが存在し、短縮型TELとTEL/PTPRRキメラに翻訳されると考えられた。野生型TELは核内に存在するが、短縮型TELおよびTEL/PTPRRキメラは細胞質内に存在していた。これらの異常分子は野生型TELとヘテロダイマーを形成することにより、その核移行を抑制すると推測された。短縮型TELとTEL/PTPRRキメラには野生型TELに認められるコリプレッサーmSin3Aとの結合能が保存されていた。また、短縮型TELとTEL/PTPRRキメラはETS結合部位に対するDNA結合能および転写抑制能を示さなかったが、野生型TELの転写抑制能をドミナントに阻害した。TEL/PTPRRキメラにはボスファターゼ活性は認められなかった。TEL/PTPRRはGM-CSF依存性に増殖するヒト白血病細胞株UT7/GMをGM-CSF非存在下でも増殖させた。短縮型TELには同様の機能は存在しなかった。さらに、短縮型TELあるいはTEL/PTPRRキメラを発現させたUT7/GM細胞はGM-CSF除去後もSIAT3のリン酸化状態を維持していた。inv(12)型白血病ではがん抑制因子TELが機能的に失活し、STAT3シグナルが恒常的に活性化していると考えられた。

使用Inv（12）（P13Q13）的3'-Race方法克隆新型的嵌合基因tel/pTPRR，该方法在急性髓样白血病中观察到。将所得的嵌合cDNA与TEL基因的第四外显子和PTPRR基因的第七外显子融合在一起。 PTPRR是用于TEL转运的第一个受体型酪氨酸磷酸酶基因。从TEL/PTPRR基因转录的mRNA中有10种类型的同工型，被认为被转化为截短的TEL和TEL/PTPRR嵌合体。野生型Tels存在于细胞核中，而细胞质中存在截短的TEL和TEL/PTPRR嵌合体。据推测，这些异常分子会通过用野生型Tels形成异二聚体来抑制其核易位。缩写的TEL和TEL/PTPRR嵌合体保留了Corepressor MSIN3A的结合能力，该结合能力在野生型Tels中发现。此外，截短的TEL和TEL/PTPRR嵌合体没有显示出对ETS结合位点的DNA结合能力或转录抑制能力，但确实抑制了野生型TEL的转录抑制能力。在TEL/PTPRR嵌合体中未观察到bossphatase活性。 TEL/PTPRR允许以GM-CSF依赖性方式生长的人类白血病细胞系UT7/GM在没有GM-CSF的情况下生长。缩短电话中没有类似功能。此外，即使在GM-CSF去除后，表达截短的TEL或TEL/PTPRR嵌合体的UT7/GM细胞仍处于SIAT3的磷酸化状态。据认为，INV（12）白血病，抑制癌症TEL在功能上停用，并且STAT3信号不断激活。