コンディショナルマウスを用いたヒト白血病関連転写因子の機能解析

使用条件小鼠对人类白血病相关转录因子进行功能分析

• 批准号: 12877155
• 负责人: 三谷 絹子
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Dokkyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877155/
• 关键词: AML1; コンディショナル; Lck; Tリンパ球; コンディショナルマウス; LCK; Creリコンビナーゼ; トランスジェニックマウス; T細胞

AML1は多くの白血病で21q22転座に伴う再構成あるいは点突然変異を起こす遺伝子であり、正常造血の発生・分化に重要な役割を担っている。AML1floxマウスとLck-Creトランスジェニックマウスを交配することにより、Tリンパ球特異的にAML1遺伝子を不活化させた。このAML1コンディショナルマウスではDN, DP, CD4 SP, CD8 SPを含む胸腺T細胞が激減していたが、これはDN3(CD25(+), CD44(-))からDN4(CD25(-), CD44(-))への分化障害の結果であると考えられた。脾臓ではB細胞は正常に保たれていたが、CD4及びCD8 SP細胞は低下していた。TCRβの発現はCD8 SP細胞では保たれていたがCD4 SP細胞では低下しており、CD4 SP細胞の分化障害が存在すると考えられた。抗CD3抗体を用いた検討では、AML1コンディショナルマウスではDP細胞のnegative selectionが観察されず、AML1がDP細胞のnegative selectionに重要な役割を担っていることが明らかになった。さらに、抗CD3抗体及びIL-2で刺激した際のCD4及びCD8 SP細胞の増殖もAML1コンディショナルマウスでは障害されていた。最後に、AML1コンディショナルマウスでは脾臓の胚中心の形成が著しく障害されており、IgG1, IgG2a, IgG2b, IgAの産生が低下しIgMの産生は増加していた。これらの表現型は、脾臓におけるCD4 SP細胞とB細胞の相互作用の障害によりB細胞のクラススイッチが正常に営まれないことを示している。AML1はT細胞分化の各段階で重要な役割を担っていると結論された。

AML1 is a multiple-cell leukemia with a 21q22 locus that is associated with recombination. It is important for normal hematopoiesis development and differentiation. AML1 flox AML1 gene expression is the result of DN, DP, CD4 SP, CD8 SP, CD3 (CD25 (+), CD44 (-)), CD4 (CD25 (-), CD44 (-)), CD4 (CD25 (-), CD44 (-), CD4 (CD25 (-), CD44 (-), CD45 (-), CD44 (-), CD45 (+), CD44 (-), CD45 (+), CD44 (+), CD45 (+), CD44 (+), CD44 (+), CD45 (+), CD44 (+), CD44 (+), CD45 (+), CD44 (+), CD44 (+ In the spleen, B cells remained normal, while CD4 and CD8 SP cells remained low. The expression of TCRβ in CD8 SP cells is not protected, but CD4 SP cells are inhibited. Anti-CD3 antibodies are used in the detection of AML1 and DP cells, and in the detection of AML1 and DP cells. Anti-CD3 antibodies and IL-2 stimulate the proliferation of CD4 and CD8 SP cells and inhibit their proliferation. Finally, AML1 protein was detected and the embryonic center formation was impaired. IgG1, IgG2a, IgG2b, IgA production was decreased and IgM production was increased. The phenotype of CD4 SP cells and B cells is different from that of normal cells. AML1 plays an important role in the differentiation of T cells.

项目成果

Izutsu, K.: "The corepressor CtBP interacts with Evi-1 to repress transforming growth β signaling"Blood. 97. 2815-2822 (2001)

Izutsu, K.：“辅阻遏物 CtBP 与 Evi-1 相互作用，抑制转化生长 β 信号传导”Blood. 97. 2815-2822 (2001)

Imai,Y.: "Mutations of the Smad4 gene in acute myelogenous leukemia and their functional implications in Ieukemogenesis."Oncogene. 20. 88-96 (2000)

Imai,Y.：“急性髓性白血病中 Smad4 基因的突变及其在白血病发生中的功能意义。”癌基因。

Nakamura, Y.: "Expression od the TEL/EVI1 fusion transcript in a patient with chronic myelogenous leukemia with t(3 ; 12)(q26 ; p13)."Am J Hematol. 69. 80-82 (2002)

Nakamura, Y.：“TEL/EVI1 融合转录物在患有 t(3 ; 12)(q26 ; p13) 的慢性粒细胞白血病患者中的表达。”Am J Hematol。

Hirai, H.: "Oncogenic mechanisms of Evi-1 protein."Cancer Chem Pharm. 48. 35-40 (2001)

Hirai, H.：“Evi-1 蛋白的致癌机制。”Cancer Chem Pharm。

Ueno,H.: "Association of insulin receptor substrate proteins with bcl-2 and their effects on its phospholylation and antiapoptotic function. "Mol Biol Cell. 11. 735-746 (2000)

Ueno, H.：“胰岛素受体底物蛋白与 bcl-2 的关联及其对其磷酸化和抗凋亡功能的影响。”Mol Biol Cell。