Tecキナーゼを介する細胞増殖機構

Tec激酶介导的细胞增殖机制

• 批准号: 08265254
• 负责人: 間野 博行
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08265254/
• 关键词: チロシンキナーゼ; サイトカイン

Tecキナーゼが具体的にどのような生理活性を担っているかを明らかにする目的で、Tecあるいは他の非受容体型チロシンキナーゼ発現プラスミドをマウスIL-3依存性細胞株BA/F3細胞に電気穿孔法にて導入した。またその際、レポータープラスミドとしてc-fos promoter/luciferaseを同時に導入し、各キナーゼによるプロモーター活性可を検討した。その結果Tecが非常に強くc-fos転写を誘導することが判った。さらに不活型Tecキナーゼを導入した場合は、サイトカインによるc-fos活性化をdominant negativeに抑制することも判りTecがサイトカインシグナルの中でc-fos転写調節を担っていることが明らかになった。次にTecの下流分子を同定する目的で、Tecのキナーゼドメインを"bait"としてyeast two hybrid screeningを行った結果、7種類のTec-Interacting Proteins(TIPs)が同定された。そのうちTIP-1はGrb10/GrbIRと呼ばれるアダプター分子であった。我々はGrb10/GrbIRがTecと細胞内で構成的に会合することを確認しただけでなく、TecによってGrb10/GrbIRが極めて強くチロシンリン酸化されることを明らかにした。さらにBA/F3細胞にGrb10/GrbIRを導入することでサイトカインによるc-fos活性化は抑制されることも明らかになった。したがってTecは細胞内でc-fos活性化機構をONにするだけでなくnegative feedback loopもスタートさせることが示された。

Tec was introduced into IL-3 dependent cell line BA/F3 by electroporation. The activity of c-fos promoter/luciferase can be investigated simultaneously. The result is very strong. In the case of inactive Tec, c-fos activation is dominant negative. In the case of inactive Tec, c-fos activation is dominant negative. In the case of inactive Tec, c-fos activation is dominant negative. Tec's downstream molecules are identified for the purpose of "bait" and "yeast two hybrid screening." Seven types of Tec-Interacting Proteins(TIPs) are identified. Grb10/GrbIR Grb10/GrbIR is the most important component of Tec. Grb10/GrbIR is introduced into BA/F3 cells and c-fos activation is inhibited. The c-fos activation mechanism in Tec cells is ON and the negative feedback loop is OFF.

项目成果

Honda,H.: "Cloning and characterization of mouse tec promoter" Biochem.Biophys.Res.Commun.223. 422-426 (1996)

Honda, H.：“小鼠 tec 启动子的克隆和表征”Biochem.Biophys.Res.Commun.223。

Miyazato,A.: "Tec protein-tyrosine kinase is involved in the signaling mechanism of granuloayte colony stimulating factor receptor" Cell Growth Differ.7. 1135-1140 (1996)

Miyazato,A.：“Tec 蛋白酪氨酸激酶参与粒细胞集落刺激因子受体的信号传导机制”Cell Growth Differ.7。

Kazawa,A.: "High expression of the tec gene product in murine testicular germ cells and erythroblasts" Pathol.Int.46. 341-347 (1996)

Kazawa,A.：“tec 基因产物在小鼠睾丸生殖细胞和成红细胞中的高表达”Pathol.Int.46。

Mano,H.: "Tec protein-tyrosine kinase is an effector molecule of Lyn protein-tyrosine kinase" FASEB J.10. 637-642 (1996)

Mano,H.：“Tec 蛋白酪氨酸激酶是 Lyn 蛋白酪氨酸激酶的效应分子”FASEB J.10。

Yamashita,Y.: "Deletion of Src homology 3 domain results in unstitutive activation of Tec protein-tyrosine kinase" Jpn.J.Cancer Res.87. 1106-1110 (1996)

Yamashita,Y.：“删除 Src 同源 3 结构域会导致 Tec 蛋白酪氨酸激酶的非组成性激活”Jpn.J.Cancer Res.87。