変異c‐kit遺伝子導入によるドミナント・ネガティブ抗腫瘍効果の解析

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ヒト胃癌細胞ECC12はc‐kitとstem cell factor(SCF)を同時に発現しており、これによるオートクリン増殖がおこなわれている。一方GCIY細胞は、正常c‐kitと子分子c‐kitを発現しているが、SCFを投与しても、そのチロシン・リン酸化は見られず、また細胞増殖も促進されない。そこで、本細胞からc‐kitをクローニングしたところ、正常c‐kitと同時に、変異によりストップ・コドンとなった小分子c‐kitが得られた。本小分子c‐kitはチロジン・キナーゼ・ドメインのチロジン残基がストップ・コドンとなっており、したがってチロジン・リン酸化による二量体が生成されない可能性がある。これらのcDNAの全長を得、これを別々に、または同時にCOS細胞に導入したところ、正常c‐kitのみの導入細胞ではSCFによりc‐kitのチロシン・リン酸化がみられ、細胞増殖も促進されたが、小分子c‐kitのみの導入では変化はみられなかった。さらにこれらを同時に発現したCOS細胞では、SCFによるチロシン・リン酸ならびに増殖促進効果はc‐kitのみの導入細胞より著名に抑制されていた。以上より、小分子c‐kit遺伝子は、SCFと結合はするもののSCF受容体としてまったく機能していないと考えられた。さらに小分子c‐kitは正常c‐kitの作用を抑制するドミナント・ネガティブ効果をもつことが示された。以上の事実から、c‐kitを発現している癌に対して本小分子c‐kit遺伝子を用いることにり、遺伝子治療がおこなえる可能性が考えられた。