RB蛋白質のリン酸化による核内局在性変化の解析
RB蛋白磷酸化引起的核定位变化分析
基本信息
- 批准号:08274224
- 负责人:
- 金额:$ 1.15万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:1996
- 资助国家:日本
- 起止时间:1996 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
RB蛋白質の細胞増殖抑制能は細胞周期特異的リン酸化で制御されている。一方で、RB蛋白質は何らかの核の構造体と結合していて、その結合もRB蛋白質のリン酸化で制御されているるらしいが、実体は不明である。本研究はその解明を目指した。そして、目的のために、我々が作製した、RB蛋白質のリン酸化サイト特異的抗体を用いることを考えた。その結果、次のような研究成果が得られた。先ず、RB蛋白質のリン酸化を行う酵素について詳細な解析を行った結果、Cdk4-サイクリンD1によるリン酸化の共通モチーフがCdk2-E/Aによるリン酸化のそれとは異なること、さらに、RB蛋白質上の12-13カ所のリン酸化サイトのうち少なくともSer780は、細胞周期において、Cdk4-サイクリンD1によって特異的にリン酸化されることを明らかにした。逆に、Thr356は、Cdk4-サイクリンD1によってはリン酸化されないけれどもCdk2-E/Aによってリン酸化されるサイトらしいことをつきとめつつある。また、我々は、リン酸化されたSer780を含む、13カ所すべての推定リン酸化サイトに対応する抗体を、化合合成したペプチドを抗原として用いて作製した。同調化したT98G細胞で調べると、これらの抗体は、リン酸化RB蛋白質を細胞周期の異なった時期に検出した。さらに、こうしたリン酸化サイト特異的な抗体を用いて、RB蛋白質のどのサイトがリン酸化された時にRB蛋白質が核の構造体から解離するのかを解析中である。
The cell proliferation inhibitory effect of RB protein can be controlled through cell cycle-specific phosphorylation. One side, RB protein core structure and combination, combination The acidification of RB protein is controlled by acidification, and the body is unknown. The purpose of this study is to explain the meaning of the method clearly.そして, purpose of のために, I 々が production of した, RB protein のリン acidified サイト specific antibody を use いることをtest of えた. The result of the research is the result of the research. First, RB protein acidification enzyme analysis detailed analysis results, Cdk4-サイクリンD1 Acidified common モチーフがCdk2-E/A Acidified のそれとはISO なること,さらに、RB protein on の12-13 のリン acidified サイトのうち小なくともSer780は, cells Cycle において, Cdk4-サイクリンD1 によって specific にリン acidification されることを明らかにした. Inverse, Thr356は, Cdk4-サイクリンD1によってはリンacidificationされないけれどもCdk2-E/Aによってリンacidified されるサイトらしいことをつきとめつつある.また, I々は, リン acidified されたSer780をcontaining む, 13カSO すべての presumed リン acid Chemical synthesis of antibodies, chemical synthesis of antigens, and synthesis of antibodies. Synchronization of the T98G cells, synchronization of the antibody, and erythrolyzed RB protein during the cell cycle are carried out at different stages.さらに、こうしたリンAcidified サイト-specific なantibodies を Use いて、RB protein のどのサイトがリン acidification された时にRB protein がnuclear structure から dissociation するのかをanalytic 中である.
项目成果
期刊论文数量(8)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Taya,T.: "RB-kinases and RB-binding proteins : new points of view." Trends Biochem.Sci.22. 14-17 (1997)
Taya,T.:“RB 激酶和 RB 结合蛋白:新观点。”
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- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Taya,Y.et al.: "Cdk4-cyclin D1 and Cdk2-cyclin E/A phosphorylate different sites in the RB protein." Genomic Instability and Immortality in Cance. (in press).
Taya,Y.et al.:“Cdk4-cyclin D1 和 Cdk2-cyclin E/A 磷酸化 RB 蛋白中的不同位点。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Kitagawa,M.et al.: "The consensus motif for phosphorylation by cyclin D1-Cdk4 is different from that for phosphorylation by cyclin A/E-Cdk2." EMBO J. 15. 7060-7069 (1996)
Kitakawa,M.et al.:“细胞周期蛋白 D1-Cdk4 磷酸化的共有基序与细胞周期蛋白 A/E-Cdk2 磷酸化的共有基序不同。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Higashi,H.et al.: "Cyclin-dependent kinase-2 (Cdk2) forms an inactive complex with cyclin D1 since Cdk2 associated with cyclin D1 is not phosphorylated by Cdk7-cyclin H" Eur.J.Biochem.237. 460-467 (1996)
Higashi, H. 等人:“细胞周期蛋白依赖性激酶 2 (Cdk2) 与细胞周期蛋白 D1 形成无活性复合物,因为与细胞周期蛋白 D1 相关的 Cdk2 不会被 Cdk7-细胞周期蛋白 H 磷酸化”Eur.J.Biochem.237。
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- 作者:
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