p53のリン酸化による活性調節機構の解析

p53磷酸化活性调节机制分析

• 批准号: 10044336
• 负责人: 田矢 洋一
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for international Scientific Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10044336/
• 关键词: p53; リン酸化; ATR; ATM; MDM2; アセチル化

Carol Prives教授とのこの共同研究のために、先ず、p53上の推定されるリン酸化部位(約13カ所)を特異的に認識する抗体をほぼすべて作製した。C末端側の2カ所のアセチル化部位に対する抗体も作製した。p53は普通の細胞ではごく微量しか存在しないけれども、ガンマ線や化学発癌物質などでDNAにダメージを受けると増加してきて、転写活性化能ももつようになる。その際、mRNAは増加しない。そのメカニズムはすでに前年度の共同研究で明らかにしていた。即ち、DNAダメージによってp53のN末端から15番目にあるセリン残基のリン酸化が誘導されて、MDM2蛋白質がp53に結合しなくなり、その結果、安定化されて、転写活性化能も高まることを明らかにした。今年度は、その研究をさらに発展させ、Ataxia telangiectaciaの原因遺伝子であるATM蛋白質がプロテインキナーゼの活性をもち、しかも、p53のSer15を直接にリン酸化することを証明した。ATMのファミリーであるATRについても同様のことを見い出した。さらには、N末端側のSer15,20,33がin vivoでリン酸化されるためには、C末端側にあるテトラマー形成ドメインが必要であることを見つけた。

Prof. Carol Prives and his colleagues have jointly studied and identified the putative acid sites (about 13 sites) on p53 and the specific antibodies. C-terminal 2-region antibody-mediated cleavage p53 is present in trace amounts in normal cells, and is linked to the presence of carcinogenic chemicals in DNA. At the same time, mRNA increased. A joint study was conducted in the previous year. That is, DNA fragmentation, DNA fragmentation, p53 N-terminal cleavage, MDM2 protein cleavage, DNA fragmentation, DNA fragmentation This year's research has been developed to demonstrate the direct activation of ATM protein by Ataxia telangiectacia and p53 and Ser15. ATR is the most important part of ATM. Ser15,20,33 on the N-terminal side in vivo, Ser15,20,33 on the C-terminal side in vivo, Ser 15, 33 on the C-terminal side in vivo.

项目成果

Nagata,Y.et al.: "The stabilization mechanism of mutant-type p53 by impaired ubiquitination: the loss of wild-type p53 function and the hsp90 association" Oncogene. (in press). (1999)

Nagata,Y.et al.：“泛素化受损导致突变型 p53 的稳定机制：野生型 p53 功能的丧失和 hsp90 关联”Oncogene。

Canman,C.E.et al.: "Activation of the ATM kinae by ionizing radiation and phosphorvlation of p53." Science. 281. 1677-1679 (1998)

Canman,C.E.等人：“通过电离辐射和 p53 磷酸化激活 ATM 激酶。”