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真核細胞RecQ相同遺伝子のDNA組み換え・減数分裂・染色体分離における役割

真核 RecQ 同源基因在 DNA 重组、减数分裂和染色体分离中的作用

基本信息

批准号：
08275205
负责人：
関政幸
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

我々は出芽酵母SGSI遺伝子破壊二倍体株で胞子形成能の低下及び減数分裂時のDNA組み換え能の低下した現象をもとに本研究を進めている。また出芽酵母SGSlはDNAトポイソメラーゼIIIとも相互作用することから、酵母トボIIIについても平行して解析した。1)SGSlのDNAヘリカーゼ活性が出芽酵母の減少分裂に必須の役割を果たしているか調べるため、SGSl遺伝子破壊株がメチルメタンスルホン酸エステルの感受性があることを利用して変異SGSl遺伝子を作製した。具体的にはSgslのヘリカーゼモチーフのミスセンス変異を導入したメチルメタンスホン酸エステル感受性になった変異ヘリカーゼ遺伝子を選択できた。現在これらの変異SGSl遺伝子がSGSl遺伝子破壊株の低い胞子形成能を相補できるかテスト中である。2)出芽酵母SGSl遺伝子は胞子形成の際、転写レベルで誘導されることを見出した。つまり減数分裂の際、Rad51, 52蛋白と同様に誘導される酸素群の一員であった。3)出芽酵母SGSl蛋白質の遺伝子工学的産生に成功した。得られた蛋白質をもとに生化学的解析を開始するとともに、抗原としても利用しウサギポリクローナル抗体を得た。この抗体を用いてSgslの蛋白レベルでの発現を検討中である。4)出芽酵母トポIII変異株はその強いミュウテーター活性及び遅い増殖能のため、トポIIIの欠損が減数分裂で働いているか否かの判定は極めてむずかしい。そこで我々は条件によってトポIIIが欠損するような酵母二倍体をほぼ作製した。

The study on the decrease of spore formation ability and meiotic DNA sequence change ability of budding yeast SGSI gene was carried out. The budding yeast SGS1 can be analyzed in parallel with the yeast SGS1. 1) SGS1 DNA sequence activity is required for budding yeast to reduce division, and SGS1 DNA sequence activity is required for budding yeast to reduce division. Specific Sgsl's selection process is different from the selection process. Now, we have different SGS1 genes and SGS1 genes, and we have different SGS1 genes and SGS1 genes. 2)The budding yeast SGS1 gene is produced at the time of spore formation. Rad51, 52 proteins and isoforms are induced during meiosis and are members of the acid group. 3)Production of budding yeast SGS1 protein by genetic engineering was successful. The analysis of protein and protein was carried out. The development of Sgsl protein is under discussion. 4)The budding yeast III mutant has strong activity and reproductive ability. The budding yeast III is deficient in meiosis. The budding yeast III mutant has strong activity and reproductive ability. The yeast diploid is under control.