T4ファージ小尾繊維の形成と分子シャペロン

T4噬菌体尾部纤维的形成和分子伴侣

• 批准号: 09261207
• 负责人: 有坂 文雄
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09261207/
• 关键词: 熱変性; グアニジン塩酸変性; ストップドフローCD; 分子シャペロン; 繊維状蛋白質; four helix-bundle; 示差走査型微少熱量計

T4ファージの尾繊維及び小尾繊維の形成に必須でファージにコードされている分子シャペロンgp57A(gp=gene product、57Aは遺伝子名)をコードする遺伝子をクローニングして大量発現系を構築した。本タンパク質は円2色性(CD)スペクトルによれば約94%がαヘリックスからなり、沈降平衡法に基づく超遠心分析の結果、4量体を形成していることが明らかとなった。また、沈降係数と分子量から求めた摩擦比から、回転楕円体に近似したときの軸比を求めると15となり、細長いタンパク質である。さらに、本蛋白質の一次配列をヘリックス車輪(helix-wheel)上にプロットしてみると、N末端側約50残基でaおよびbの位置にLeu,lleなどの疎水性アミノ酸が多く見いだされた。従って、N端末側約50残基の領域で4ヘリックスバンドルを形成している可能性が高い。他方、同蛋白質の塩酸グアニジンによる変性を、沈降平衡法およびCDによって測定した結果、2次構造の喪失に先立ってまず4量体の解離が起こることが示唆された。示差走査型微少熱量測定(DSC)でも2段階の可逆的な熱転移が測定されたが、同じ熱変性を円2色性(CD)でモニターしたところ、いずれの移転点でもCD値の変化が認められた。従って、2段階いずれの段階でもαヘリックスの形成があると考えられる。pH7.5,8.3,9.0の3点で測定した結果に対して城所らの理論に基づいて解析した。その結果、2量体を経由する3状態モデルがよくデータを説明することが分かった。

In T4, both the tail and the tail are required to cause a large number of errors in the system. The molecular weight of the molecule is the same as that of gp57A (gp=gene product, 57A gene subname). In this paper, the results of color analysis (CD), color measurement (color), color (color), color, color, The molecular weight of water and sedimentation is calculated by calculating the friction ratio, the temperature of the return temperature is approximately equal to that of the temperature, and the temperature of the temperature is higher than that of 15. In one step, the protein and protein were arranged in a single column (helix-wheel). The position of the N-terminal protein was about 50 residues (a

项目成果

Shigeki TAKEDA: "Mapping of Functional Sites on the Primary Structure of the Tail Lysozyme of Bacteriophage T4 by Mutation Analysis" Biochem.Biophys.Acta. (in press).

Shigeki TAKEDA：“通过突变分析绘制噬菌体 T4 尾部溶菌酶一级结构的功能位点”Biochem.Biophys.Acta。

中村春木: "タンパク質のかたちと物性(共編著)" 共立出版社, 234 (1997)

Haruki Nakamura：“蛋白质的形状和物理性质（共同编辑）”Kyoritsu Shuppansha，234（1997）

武田茂樹: "ネガティブ染色…簡便で高分解能の染色法" 細胞工学. 16・6. 881-889 (1997)

武田茂树：“负染色...简单且高分辨率的染色方法”《细胞工程》16・6（1997）。

Hisayuki MORII: "Identification of Kinesin Neck Region as a Stable α-Helical Coiled-Coil and Its Themodynamic Charcterization" Biochemistry. 36・7. 1933-1942 (1997)

Hisayuki MORII：“驱动蛋白颈部区域作为稳定 α-螺旋卷曲线圈的鉴定及其热力学表征”生物化学 36・7（1997）。

Takayo SASAKI: "Nucleotide Sequences of the Contractile Tail Sheath and Tube Genes of Bacteriophage PS17 and Amino Acid Sequences of Their Products" Res.Comm.Biochem,& Mol.Biol. 1・1. 93-106 (1997)

Takayo SASAKI：“噬菌体 PS17 的收缩尾鞘和管基因的核苷酸序列及其产物的氨基酸序列”Res.Comm.Biochem，& Mol.Biol 1・1（1997）。