课题基金 / 基金详情

T4ファージ小尾繊維の形成と分子シャペロン

T4ファージ小尾繊維の形成と分子シャペロン
T4噬菌体尾部纤维的形成和分子伴侣
批准号：
09261207
负责人：
有坂 文雄
金额：
$0.96万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1997 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09261207/
关键词：
熱変性グアニジン塩酸変性ストップドフローCD分子シャペロン繊維状蛋白質four helix-bundle示差走査型微少熱量計

项目摘要

项目成果

有坂 文雄的其他基金

相关文献

中文摘要
翻译
T4ファージの尾繊維及び小尾繊維の形成に必須でファージにコードされている分子シャペロンgp57A(gp=gene product、57Aは遺伝子名)をコードする遺伝子をクローニングして大量発現系を構築した。本タンパク質は円2色性(CD)スペクトルによれば約94%がαヘリックスからなり、沈降平衡法に基づく超遠心分析の結果、4量体を形成していることが明らかとなった。また、沈降係数と分子量から求めた摩擦比から、回転楕円体に近似したときの軸比を求めると15となり、細長いタンパク質である。さらに、本蛋白質の一次配列をヘリックス車輪(helix-wheel)上にプロットしてみると、N末端側約50残基でaおよびbの位置にLeu,lleなどの疎水性アミノ酸が多く見いだされた。従って、N端末側約50残基の領域で4ヘリックスバンドルを形成している可能性が高い。他方、同蛋白質の塩酸グアニジンによる変性を、沈降平衡法およびCDによって測定した結果、2次構造の喪失に先立ってまず4量体の解離が起こることが示唆された。示差走査型微少熱量測定(DSC)でも2段階の可逆的な熱転移が測定されたが、同じ熱変性を円2色性(CD)でモニターしたところ、いずれの移転点でもCD値の変化が認められた。従って、2段階いずれの段階でもαヘリックスの形成があると考えられる。pH7.5,8.3,9.0の3点で測定した結果に対して城所らの理論に基づいて解析した。その結果、2量体を経由する3状態モデルがよくデータを説明することが分かった。
英文摘要
T4ファージの尾繊維及び小尾繊維の形成に必須でファージにコードされている分子シャペロンgp57A(gp=gene product、57Aは遺伝子名)をコードする遺伝子をクローニングして大量発現系を構築した。本タンパク質は円2色性(CD)スペクトルによれば約94%がαヘリックスからなり、沈降平衡法に基づく超遠心分析の結果、4量体を形成していることが明らかとなった。また、沈降係数と分子量から求めた摩擦比から、回転楕円体に近似したときの軸比を求めると15となり、細長いタンパク質である。さらに、本蛋白質の一次配列をヘリックス車輪(helix-wheel)上にプロットしてみると、N末端側約50残基でaおよびbの位置にLeu,lleなどの疎水性アミノ酸が多く見いだされた。従って、N端末側約50残基の領域で4ヘリックスバンドルを形成している可能性が高い。他方、同蛋白質の塩酸グアニジンによる変性を、沈降平衡法およびCDによって測定した結果、2次構造の喪失に先立ってまず4量体の解離が起こることが示唆された。示差走査型微少熱量測定(DSC)でも2段階の可逆的な熱転移が測定されたが、同じ熱変性を円2色性(CD)でモニターしたところ、いずれの移転点でもCD値の変化が認められた。従って、2段階いずれの段階でもαヘリックスの形成があると考えられる。pH7.5,8.3,9.0の3点で測定した結果に対して城所らの理論に基づいて解析した。その結果、2量体を経由する3状態モデルがよくデータを説明することが分かった。
期刊论文(7)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Shigeki TAKEDA: "Mapping of Functional Sites on the Primary Structure of the Tail Lysozyme of Bacteriophage T4 by Mutation Analysis" Biochem.Biophys.Acta. (in press).
Shigeki TAKEDA：“通过突变分析绘制噬菌体 T4 尾部溶菌酶一级结构的功能位点”Biochem.Biophys.Acta。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
中村春木: "タンパク質のかたちと物性(共編著)" 共立出版社, 234 (1997)
Haruki Nakamura：“蛋白质的形状和物理性质（共同编辑）”Kyoritsu Shuppansha，234（1997）
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
武田茂樹: "ネガティブ染色…簡便で高分解能の染色法" 細胞工学. 16・6. 881-889 (1997)
武田茂树：“负染色...简单且高分辨率的染色方法”《细胞工程》16・6（1997）。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Hisayuki MORII: "Identification of Kinesin Neck Region as a Stable α-Helical Coiled-Coil and Its Themodynamic Charcterization" Biochemistry. 36・7. 1933-1942 (1997)
Hisayuki MORII：“驱动蛋白颈部区域作为稳定 α-螺旋卷曲线圈的鉴定及其热力学表征”生物化学 36・7（1997）。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 7 条
    量子導線および蛍光ナノチューブを作成するためのナノリング蛋白質の合成制御
    • 批准号：
      09F09095
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for JSPS Fellows
    • 资助金额：
      $1.28万
    • 财政年份：
      2009
    • 负责人：
      有坂 文雄
    • 依托单位：
      Tokyo Institute of Technology
    T4ファージの粒子形成に関わる分子間相互作用の解明
    • 批准号：
      16041213
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $3.84万
    • 财政年份：
      2004
    • 负责人：
      有坂 文雄
    • 依托单位：
      Tokyo Institute of Technology
    バクテリオファージゲノム及び遺伝子の共通性と多様性
    • 批准号：
      14015211
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $1.92万
    • 财政年份：
      2002
    • 负责人：
      有坂 文雄
    • 依托单位：
      Tokyo Institute of Technology
    T4ファージ収縮性尾部の分子間相互作用
    • 批准号：
      13033009
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $2.3万
    • 财政年份：
      2002
    • 负责人：
      有坂 文雄
    • 依托单位：
      Tokyo Institute of Technology