T4ファージ尾繊維形成に関わる分子シャペロン

参与 T4 噬菌体尾纤维形成的分子伴侣

• 批准号: 11153207
• 负责人: 有坂 文雄
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11153207/
• 关键词: 分子シャペロン; 繊維状蛋白質; co-シャペロン; Far-Westernブロット法; 偽復帰突然変異体; バクテリオファージ

T4ファージの尾繊維形成に関与する分子シャペロン様蛋白質gp57Aはオリゴマ-蛋白質としては珍しくきわめて高度に熱変性や変性剤よる変性を行う。この蛋白質の解離会合に関する性質を調べることを目的として広範囲の濃度にわたって重量平均浮揚分子量を調べた。高濃度側ではレイリー干渉計、低濃度側は紫外吸収モニターを用いた。その結果、50倍の濃度領域にわたってデータを取ることが出来た。並行して低濃度側領域では220nmでの円偏光二色性による測定も行い、濃度が減少するに従って残基楕円率が減少した。沈降平衡の測定は種々の濃度の塩酸グアニジン存在下および10℃から40℃までの4点の異なる温度でも行った。その結果、本蛋白質の基本会合体は二量体であること、単量体は二次構造を持たないこと、20℃で低濃度側では2量体-6量体間の平衡にあり、高濃度側ではさらに6量体同士が会合していく傾向が見いだされた。しかし、40℃になると特に低濃度側では単量体の存在が顕著であった。他方、化学架橋試薬による架橋反応では3量体までのオリゴマーが顕著で4量体以上の会合体はごくわずかしか見られなかった。この結果は、基本会合体中では立体構造的な理由からリシン間の架橋がかからず、架橋は6量体中のC末端側領域でのみ起こると解釈された。これらの実験と同時にテイルリゾチームgp5のオリゴマー構造が解析され、gp5のC末端ドメインは同タンパク質のベースプレートヘの分子集合の過程で3量体を形成するのに必要であって分子内シャペロン的な機能を持つことが明らかになった。テイルリゾチームは感染時には単量体として外膜内に放出される。

T4 protein is highly variable in its molecular form. The properties of protein dissociation are regulated by the concentration of protein. The high concentration side is a dry meter, and the low concentration side is a UV absorber. 50 times the concentration in the field. In parallel, in the low concentration region, the polarization dichroism at 220nm was measured, and the concentration was reduced, resulting in a decrease in residue yield. Determination of the concentration of the seed in the sedimentation equilibrium in the presence of acid at temperatures ranging from 10℃ to 40℃As a result, the basic association of this protein with two quantities of protein, single quantity of protein with secondary structure, equilibrium between two quantities and six quantities at low concentration side at 20℃, and convergence tendency between six quantities at high concentration side were observed. At 40 ° C, there is a small amount of body. Other, chemical bridging test, bridging reaction, 3-volume reaction, 4-volume reaction The result is that in the basic assembly, the reason for the three-dimensional structure is to bridge the gap between the two sides, and the gap between the two sides is to bridge the gap between the two sides. In addition, the molecular assembly of gp5 is composed of three molecules. The molecular assembly of gp5 is composed of three molecules. The molecular assembly is composed of three molecules. When infected, they are released into the outer membrane.

项目成果

Shigeki TAKEDA: "Comparative Imaging of the T4 Phage Baseplate with Atomic Force and Electron Microscopy"Res. Comm. Biochem. & Mol. Biol.. (in press).

Shigeki TAKEDA：“利用原子力和电子显微镜对 T4 噬菌体底板进行比较成像”Res。

Mainul HOQUE: "Nuclear Transport of the major capsid protein is essential for Adeno-Associated Virus Capsid Formation"J. Virol.. 73-9. 7912-7915 (1999)

Mainul HOQUE：“主要衣壳蛋白的核运输对于腺相关病毒衣壳的形成至关重要”J。

Masato USHIYAMA: "A 12-Porphysin Construction of a System : Synthesis of Peptide Porphyrin with Multiple Histidines and the Aggregation Behavior in the Presence of Hemin"Bull. Chem. Soc. Japn. 72. 1351-1364 (1999)

Masato USHIYAMA：“系统的 12-卟啉构建：具有多个组氨酸的肽卟啉的合成以及氯化血红素存在下的聚集行为”公牛。

Kei-ichiro INAMORI: "A Newly Identified Horseshoe Crab Lection with Specificity for Blood Group A Antigen Recognized Specific O-Antigens of Bacterial Lipopolysaccharides"J. Biol. Chem.. 274. 3272-3278 (1999)

Kei-ichiro INAMORI：“一种新鉴定的鲎提取物，具有 A 型血型抗原特异性，可识别细菌脂多糖的特异性 O 抗原”J。

Shunji KAMAMARU: "C-terminal of the Precursor Tail Lysozyme of Bacteriophage T4 Stays as a Structural Component of the Baseplate after Cleavage"J. Bacteriology. 181. 2739-2744 (1999)

Shunji KAMAMARU：“噬菌体 T4 前体尾部溶菌酶的 C 末端在裂解后仍作为底板的结构成分”J。