T4ファージ粒子形成と分子シャペロン

T4噬菌体颗粒的形成和分子伴侣

• 批准号: 10172206
• 负责人: 有坂 文雄
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10172206/
• 关键词: 分子シャペロン; 繊維状蛋白質; co-シャペロン; Far-Westernブロット法; 偽復帰突然変異体; バクテリオファージ

T4ファージの尾部形成に関与する2つの分子シャペロン様蛋白質gp51とgp57Aについて研究を進めた。gp51については封入体を通常の方法で巻き戻したものには活性が見出されなかったが、それを大腸菌GroEL/ESと混合してインキュベートする事によって試験管内相補性検定において活性のあるgp51を得ることができた。こうして活性の得られたgp51についてFar-Westernブロット法によって相互作用するターゲット分子を検索し、いくつかの特異的に相互作用する分子を見いだしたが、シャペロン活性について必ずしも明確な答えを得ることはできなかった。そこで、現在基盤中心軸遺伝子クラスターをクラスタークローニングするシステムを構築し、遺伝子5,26,51,27,28,29を同時に発現させ、形成される構造体を解析することによって遺伝子51を含む各遺伝子産物の役割を明らかにするアプローチを進めている。他方、gp57Aについては昨年度の段階でgp57Aがターゲット蛋白質gp12とは直接相互作用しないことが明らかになり、さらに同蛋白質の構造が大腸菌GrpEに類似しているらしいことから、gp57AにもGrpEのDnaKに対応するco-シャペロンの存在が予想された。そこで、gp51と同様にFar-Westernブロット法によりco-シャペロンの検索を行ったが、明快な答えを得ることができなかった。そこで、以下のアプローチをとることにした。即ち、大腸菌に変異を持ち、57Aアンバー株の増殖可能な変異株が報告されている。著者によればオリジナルな変異株は既に失われたようなのてこれを新たに作成し、この変異株の変異部位をマッピングすることによってgp57Aのco-シャペロンを検索する計画を進めている。

T4 protein tail formation related to the molecular structure of protein gp51 and gp57A gp51 is the most common method for determining the activity of an encapsulated substance in a test tube. This activity is obtained by the Far-Western interaction method. The molecular interaction is detected by the Far-Western interaction method. The molecular interaction is specific. In this case, the core axis of the base plate is located in the center of the base plate. The structure of the base plate is constructed by simultaneously developing and forming the structure of the base plate. The structure of the base plate is analyzed by using the structure of the base plate. The structure of the base plate is analyzed by using the structure of the base plate. The structure of the base plate includes the structure of the base plate. Other gp57A proteins interact directly with gp57A protein gp12 in the same way as Gp57A proteins in E. coli. Gp51 and the Far-Western method are used to search for and answer questions.そこで、以下のアプローチをとることにした。That is, the E. coli strain is isolated and maintained, and 57A is isolated and the strain is likely to grow. The new plant was created and the new plant was developed.

项目成果

Shigeki TAKEDA: "Discovery of the tail tube gene of bacteriophage Mu and sequence analysis of the sheath and tube genes"Biochim. Biophys. Acta. 1399. 88-92 (1998)

Shigeki TAKEDA：“噬菌体Mu尾管基因的发现以及鞘和管基因的序列分析”Biochim。

有坂文雄: "超遠心分析の基礎と新たな展開(2)" 蛋白質核酸酵素. 43(14). 2145-2152 (1998)

Fumio Arisaka：“超速离心分析的基础知识和新进展 (2)”蛋白质核酸酶 43(14) (1998)。

有坂文雄: "超遠心分析の基礎と新たな展開(1)" 蛋白質核酸酵素. 43(13). 2024-2032 (1998)

Fumio Arisaka：“超速离心分析的基础知识和新进展 (1)”蛋白质核酸酶 43(13) (1998)。

有坂文雄: "超遠心分析の基礎と新たな展開(3)" 蛋白質核酸酵素. 43(15). 2238-2244 (1998)

Fumio Arisaka：“超速离心分析的基础知识和新进展 (3)”蛋白质核酸酶 43(15) (1998)。

Shigeki TAKEDA: "Mapping of Functional Sites on the Primary Structure of the Tail Lysozyme of Bacteriophage T4 by Mutation Analysis" Biochem.Biophys.Acta. 1384. 243-252 (1998)

Shigeki TAKEDA：“通过突变分析绘制噬菌体 T4 尾部溶菌酶一级结构的功能位点”Biochem.Biophys.Acta。