使用信号序列带方法创建新型癌症标志物抗体-猫眼课题宝

使用信号序列带方法创建新型癌症标志物抗体

批准号：

18659137

负责人：

北村俊雄

金额：

$2.11万

依托单位：

The University of Tokyo

依托单位国家：

日本

项目类别：

Grant-in-Aid for Exploratory Research

财政年份：

2006

资助国家：

日本

项目状态：

已结题

起止时间：

2006 至 2007

来源：

https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659137/

关键词：

シグナルペプチド発現クローニングレトロウイルスベクター抗原抗体

项目摘要

项目成果

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研究代表者らが開発したシグナルシークエンス法SST-REXを用いると、癌細胞由来の膜蛋白質および分泌蛋白質が、マウスIL-3依存性細胞株Ba/F3の細胞上に-種類ずつ発現する細胞カタログ(SSTクローンと呼ぶ)を作製することができる。SSTクローンを免疫すれば効率良くマウスモノクローナル抗体の作成が可能である。しかしながらSSTクローンにおける癌細胞由来分子の発現が低いので、昨年度はさらに効率良い系を構築するために、SSTクローン中でこれらの分子を強力なプロモーターによって発現させることを試みた。用いたプロモーターはCMV、EF1α、SRα、CAGである。これらのベクターは通常MLVのLTRの10-100倍の活性を有するが、SSTクローン(Ba/F3)ではMLVのLTRが一番強力であることが判明した。そこでSSTクローンにおける癌細胞由来分子の発現を高めるためにいろいろな試みをした。まず細胞を変えて行ってみたが、Ba/F3での発現がもっとも高いことが判明した。また、SSTクローンにヘルパーウイルスを一過性に発現させることによって、挿入されているウイルスを回収し回収したウイルスをNIH3T3あるいはBW5147に感染させることによって、癌細胞由来分子を高発現する細胞を作製することを試みたが、ウイルス回収が予想以上に効率が悪く、ここの方法論を改善する必要があることが分かった。次に、SSTベクター自身にIRES-puroを組み込み、SSTクローン樹立後にピューロマイシンで選択することにより癌細胞由来分子の発現を高めることを試みた。その結果発現量が50%程度上昇した。今後、SST-REXの方法そのものを改良することを計画している。

期刊论文(14)

专著(0)

科研奖励(0)

会议论文

Functional analysis of an activating receptor LMIR4 as a counterpart of an inhibitory receptor LMIR3.

激活受体 LMIR4 作为抑制性受体 LMIR3 的对应物的功能分析。

DOI： --

发表时间：

期刊：

J. Biol. Chem. (In press)

影响因子： --

作者：

[Baba T, Mimura J, Nakamura N, Harada N, Yamamoto M, Morohashi K, Fujii-Kuriyama Y., 沖俊彦, 中島秀明, 中島秀明, 福地由美, 川島敏行, 沖俊彦, 中島秀明, 小埜良一, 浦野敦司, 箕嶋幸範, 小埜良一, 伊沢久未]

通讯作者：伊沢久未

Rac and Nuclear Translocation of STAT Transcription Factors.

STAT 转录因子的 Rac 和核易位。

DOI： --

发表时间： 2008

期刊：

Methods in Enzymology 431

影响因子： --

作者：

[Toshiyuki Kawashima,Ying Chun Bao,Yukinori Minoshima, Yasushi Nomura,Tomonori Hatori, Tetsuya Hori, TatsuoFukagawa, Toshiyuki Fukada, NorikoTakahashi, Tetsuya Nosaka, Makoto Inoue,Tomohiro Sato, Mutsuko Kukimoto-Niino,Mikako Shirouzu, Shigeyuki Yokoyama a, Toshiyuki Kawashima, Toshiyuki Kawashima and Toshio Kitamura, Toshiyuki Kawashima, 渡辺 (大河内) 直子, 山西吉典, 川島敏行]

通讯作者：川島敏行

Integrin αIIbβ3 induces the adhesion and activation of mast cells through interaction with fibrinogen.

整合素αIIbβ3通过与纤维蛋白原的相互作用诱导肥大细胞的粘附和激活。

DOI： --

发表时间： 2006

期刊：

J. Immunol. 176

影响因子： --

作者：

[Baba T, Mimura J, Nakamura N, Harada N, Yamamoto M, Morohashi K, Fujii-Kuriyama Y., 沖俊彦]

通讯作者：沖俊彦

STAT3/5の活性化メカニズムと分子標的療法