ホヤ初期胚に局在するRNA群の機能の網羅的解析

早期海鞘胚胎RNA组功能的综合分析

• 批准号: 14034226
• 负责人: 真壁 和裕
• 金额: $ 4.35万
• 依托单位: The University of Tokushima (2003)Kyoto University (2002)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14034226/
• 关键词: ホヤ; 母性因子; RNA; 局在; EST; UTR; データベース

我々はホヤ卵内において胚の前後軸形成・不等分裂などに必須とされている植物極側後方の領域に局在するRNAを数多く単離し、その局在経路の違いからそれらがtypeIとtypeIIのふたつのグループに分類されることを明らかにした。本研究では、これらのRNAの局在を担う配列を絞り込み、その領域に結合する因子を単離することによって、ホヤの卵や胚におけるRNAの局在に関わる分子機構を明らかにするとともに、さらに卵内に局在する多数のRNAが発生過程における機能を解析するために、局在RNAに対するモリフォリノオリゴを網羅的に注入して機能欠損個体を作製し、解析することが目的である。標識した合成RNAの未受精卵への顕微注入実験から、局在にはtypeI・typeIIともに3'UTRが必要十分であることが分かった。つぎにその結果得られたそれぞれの配列に共通して見られる構造を検索すると共に、その配列に結合する因子を生化学的及び分子生物学的手法を駆使して単離し、その性状を明らかにしつつある。さらに、局在RNAが見られるCABという領域におけるRNA-タンパク質複合体の存在様式を電子顕微鏡レベルで解析して、RNAの局在機構についての知見を得た。一方、局在RNAが発生過程で担う役割を明らかにするべく、5'UTRに対するモルフォリノオリゴを網羅的に卵に顕微注入して機能欠損個体を作製し、組織分化や形態形成に果たす役割を解析している。

In the egg, the anteroposterior axis of the embryo is formed. The anteroposterior axis of the embryo is divided into two parts. The anteroposterior axis of the embryo is divided into three parts. The anteroposterior axis of the embryo is divided into In this study, we analyzed the molecular mechanism of RNA in the egg and embryo, and analyzed the function of RNA in the development process. Analysis of the purpose. Microinjection of synthetic RNA into unfertilized eggs is necessary for the identification of type I, type II and 3'UTR. The results of this study are based on a combination of structural, genetic and molecular techniques. In addition, the existence pattern of RNA-protein complex in CAB domain was analyzed by electron microscope, and the knowledge of RNA in CAB domain was obtained. A part of the RNA production process is responsible for the analysis of the effects of microinjection, microinjection and microinjection on the functioning of individuals, tissue differentiation and morphology.

项目成果

Sasakura, Y.: "Identification of the cis elements which direct the localization of maternal mRNAs to the posterior pole of ascidian embryos."Dev.Biol.. 250. 128-144 (2002)

Sasakura, Y.：“识别将母体 mRNA 定位到海鞘胚胎后极的顺式元件。”Dev.Biol.. 250. 128-144 (2002)

Kawashima, T.: "Update of MAGEST : MAboya Gene Expression patterns and Sequence Tags"Nuc.Acids Res. 30. 119-120 (2002)

Kawashima, T.：“MAGEST 更新：MAboya 基因表达模式和序列标签”Nuc.Acids Res。

Yagi, K.: "Neural marker genes differently expressed in subsets of embryonic neural cells of the ascidian Halocynthia roretzi."Zool.Sci.. 19. 885-889 (2002)

Yagi, K.：“神经标记基因在海鞘类 Halocynthia roretzi 胚胎神经细胞亚群中的不同表达。”Zool.Sci.. 19. 885-889 (2002)

Nakamura, Y.: "Localization and expression pattern of type 1 postplasmic mR in embryos of the ascidian Halocynthia roretzi."Gene Exp.Patterns. 3. 71-75 (2003)

Nakamura, Y.：“海鞘类 Halocynthia roretzi 胚胎中 1 型后质 mR 的定位和表达模式。”Gene Exp.Patterns。

Nakamura, Y.: "Localization and expression pattern of type 1 postplasmic mRNAs in embryos of the ascidian Halocynthia roretzi"Mech. Dev.. (In press). (2003)

Nakamura, Y.：“海鞘类 Halocynthia roretzi 胚胎中 1 型后质 mRNA 的定位和表达模式”Mech。