ホヤ卵の後極に局在するRNA群の局在機構と機能の網羅的解析

海鞘卵后极RNA群定位机制及功能综合分析

• 批准号: 13045018
• 负责人: 真壁 和裕
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13045018/
• 关键词: ホヤ; RNA; 局在; EST; データベース; UTR; 母性因子

我々はホヤ卵内において胚の前後軸形成・不等分裂などに必須とされている植物極側後方の領域に局在するRNAを数多く単離し、その局在経路の違いからそれらがtypeIとtypeIIのふたつのグループに分類されることを明らかにした。本研究では、これらのRNAの局在を担う配列を絞り込み、その領域に結合する因子を単離することによって、ホヤの卵や胚におけるRNAの局在に関わる分子機構を明らかにするとともに、さらに卵内に局在する多数のRNAが発生過程における機能を解析するために、局在RNAに対するモリフォリノオリゴを網羅的に注入して機能欠損個体を作製し、解析することが目的である。標識した合成RNAの未受精卵への顕微注入実験から、局在にはtypeI・typeIIともに3'UTRが必要十分であることが分かった。つぎにその結果得られたそれぞれの配列に共通して見られる構造を検索すると共に、その配列に結合する因子を生化学的及び分子生物学的手法を駆使して単離し、その性状を明らかにしつつある。さらに、局在RNAが見られるCABという領域におけるRNA-タンパク質複合体の存在様式を電子顕微鏡レベルで解析して、RNAの局在機構についての知見を得た。一方、局在RNAが発生過程で担う役割を明らかにするべく、5'UTRに対するモルフォリノオリゴを網羅的に卵に顕微注入して機能欠損個体を作製し、組織分化や形態形成に果たす役割を解析している。

In the egg, the anteroposterior axis of the embryo is formed. The anteroposterior axis of the embryo is divided into two parts. The anteroposterior axis of the embryo is divided into three parts. The anteroposterior axis of the embryo is divided into In this study, we analyzed the molecular mechanism of RNA in the egg and embryo, and analyzed the function of RNA in the development process. Analysis of the purpose. Microinjection of synthetic RNA into unfertilized eggs is necessary for the identification of type I, type II and 3'UTR. The results of this study are based on a combination of structural, genetic and molecular techniques. In addition, the existence pattern of RNA-protein complex in CAB domain was analyzed by electron microscope, and the knowledge of RNA in CAB domain was obtained. A part of the RNA production process is responsible for the analysis of the effects of microinjection, microinjection and microinjection on the functioning of individuals, tissue differentiation and morphology.

项目成果

Y.Sasakura: "Ascidian Wut-s gene is involved in the morphogenetic movement of notochord cells"Development, Growth and Differenfiation. 43. 573-582 (2001)

Y.Sasakura：“海鞘Wut-s基因参与脊索细胞的形态发生运动”的发育、生长和分化。

T.Kawashima: "Update of MAGEST : MAboya Gene Expression patterns and Sequence Tags"Nucleic Acids Research. 30. 119-120 (2002)

T.Kawashima：“MAGEST 更新：MAboya 基因表达模式和序列标签”核酸研究。

K.Yagi: "Retinoic acid differenyly affects the formation of palps and surrounding neurons in the ascidian tadpole"Developmental Genes and Evolution. (in press). (2002)

K.Yagi：“视黄酸对海鞘蝌蚪触须和周围神经元的形成有不同的影响”《发育基因与进化》。

A.Kobayashi: "Expression patterns of smad family members during embryogenesis of the ascidian Halocynthia roretzi"Zoological Science. 18. 833-842 (2001)

A.Kobayashi：“海鞘类 Halocynthia roretzi 胚胎发生过程中 smad 家族成员的表达模式”动物学科学。

K.W.Makabe: "Large-scale cDNA analysis of the maternal genetic information in the egg of Halocynthia roretzi for a gene expression catalog of ascidian development"Development. 128. 2555-2567 (2001)

K.W.Makabe：“对 Halocynthia roretzi 卵中母体遗传信息进行大规模 cDNA 分析，以获取海鞘发育的基因表达目录”。