NMRによるアミロイドβペプチドとアミロイドβペプチド結合蛋白質の相互作用解析

NMR分析淀粉样蛋白β肽和淀粉样蛋白β肽结合蛋白的相互作用

• 批准号: 16015246
• 负责人: 水口 峰之
• 金额: $ 2.62万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16015246/
• 关键词: アミロイド線維; アルツハイマー病; ゲルソリン; アミロイドβペプチド; トランスサイレチン; 原子間力顕微鏡

アルツハイマー病におけるアミロイド線維の主要な構成成分であるamyloid β - peptide (Aβ)は、40残基程度のペプチドである。本研究では、Aβ結合蛋白質であるtransthyretin, gelsolin,抗β抗体とAβの相互作用について研究した。1.原子間力顕微鏡(AFM)によるtransthyretinとAβの相互作用解析Aβ1-42のアミロイド線維は、幅約15nm、長さ約数十〜数百nmの直線状の線維として観測された。Aβ1-40のアミロイド線維は、Aβ1-42の線維と類似していたが、形成したアミロイド線維の量は少なかった。Transthyretinが存在するときには、Aβ1-40,Aβ1-42ともにアミロイド線維が形成されなかった。2.ゲルろ過クロマトグラフィーによるtransthyretinとAβの相互作用解析Aβ1-40溶液にtransthyretinを加えると、Aβオリゴマーのピークは影響を受けなかったが、モノマーのピーク強度が減少した。これらの結果から、transthyretinはAβのモノマーに結合しアミロイド線維へ凝集することを阻害していると考えられる。3.Gelsolinフラグメントの大量発現系の構築とAβとの相互作用解析Gelsolinの178-293残基(gelsolin178-293)がAβに結合しているのではないかと予想し、gelsolin178-293フラグメントの大量発現系の構築に取り組んだ。gelsolin178-293とAβの結合をBIACOREによって調べたところ、解離定数が6.8×10^<-6> (M)の弱い結合であることが分かった。

ア ル ツ ハ イ マ ー disease に お け る ア ミ ロ イ ド line d の な main composition で あ る amyloid beta peptide (A beta) は, degree of 40 residues の ペ プ チ ド で あ る. In this study, で で, Aβ -binding protein であるtransthyretin, gelsolin, and anti-β antibody とAβ <s:1> interaction に て て て た た. 1. The interatomic force 顕 micro mirror (AFM) に よ る transthyretin と A beta の interaction parsing A beta 1-42 の ア ミ ロ イ ド line d は, about 15 nm, long さ about tens to hundreds of nm の straight line shape の line d と し て 観 measuring さ れ た. A beta 1 to 40 の ア ミ ロ イ ド line d は, A beta 1-42 d と の line similar し て い た が, forming し た ア ミ ロ イ ド line d の fewer は な か っ た. Transthyretin が exist す る と き に は, A beta 1 to 40, A beta 1-42 と も に ア ミ ロ イ ド form さ d が れ な か っ た. 2. ゲ ル ろ too ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー に よ る transthyretin と A beta の interaction parsing A beta 1 to 40 solution に transthyretin を plus え る と, A beta オ リ ゴ マ ー の ピ ー ク は を by け な か っ た が, モ ノ マ ー の ピ ー が ク strength reduce し た. こ れ ら の results か ら and transthyretin は A beta の モ ノ マ ー に combining し ア ミ ロ イ ド line d へ agglutination す る こ と を resistance against し て い る と exam え ら れ る. (3) Gelsolin フ ラ グ メ ン ト の large 発 now is の build と A beta と の interaction parsing Gelsolin の residues (gelsolin178-293), 178-293 が A beta に combining し て い る の で は な い か と to think し, gelsolin178-293 フ ラ グ メ ン ト の 発 now is の Construct a set of に and んだ. Gelsolin178-293 と A beta の combining を BIACORE に よ っ て adjustable べ た と こ ろ, dissociation constant が 6.8 * 10 ^ 6 > < - (M) の weak い で あ る こ と が points か っ た.

项目成果

The Gly-Gly linker region of the insect cytokine growth blocking peptide (GBP) is essential for activity.

昆虫细胞因子生长阻断肽 (GBP) 的 Gly-Gly 连接区对于活性至关重要。

• 发表时间: 2004
• 期刊: J. Biol. Chem. 279(49)
• 作者: Yoshida;M.
• 通讯作者: M.

Dimeric transthyretin variant assembles into spherical neurotoxins.

二聚体运甲状腺素蛋白变体组装成球形神经毒素。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Biochemistry 44
• 作者: Matsubara;K.
• 通讯作者: K.

Letter to the Editor: 1H, 13C, and 15N Resonance Assignments of Human Microtubule-associated Protein Light Chain-3

致编辑的信：人类微管相关蛋白轻链 3 的 1H、13C 和 15N 共振分配

• DOI: 10.1023/b:jnmr.0000032505.99071.ea
• 发表时间: 2004
• 期刊: Journal of Biomolecular NMR
• 影响因子: 2.7
• 作者: T. Kouno;M. Mizuguchi;I. Tanida;T. Ueno;E. Kominami;K. Kawano
• 通讯作者: K. Kawano

Peptide mimics of epidermal growth factor (EGF) with antagonistic activity

• DOI: 10.1016/j.jbiotec.2004.10.021
• 发表时间: 2005-03-30
• 期刊: JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
• 影响因子: 4.1
• 作者: Nakamura, T;Takasugi, H;Kawano, K
• 通讯作者: Kawano, K