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NMRによるアミロイドβペプチドとアミロイドβペプチド結合蛋白質の相互作用解析

NMR分析淀粉样蛋白β肽和淀粉样蛋白β肽结合蛋白的相互作用

基本信息

批准号：
16015246
负责人：
水口峰之
金额：
$ 2.62万
依托单位：
Toyama Medical and Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

アルツハイマー病におけるアミロイド線維の主要な構成成分であるamyloid β - peptide (Aβ)は、40残基程度のペプチドである。本研究では、Aβ結合蛋白質であるtransthyretin, gelsolin,抗β抗体とAβの相互作用について研究した。1.原子間力顕微鏡(AFM)によるtransthyretinとAβの相互作用解析Aβ1-42のアミロイド線維は、幅約15nm、長さ約数十〜数百nmの直線状の線維として観測された。Aβ1-40のアミロイド線維は、Aβ1-42の線維と類似していたが、形成したアミロイド線維の量は少なかった。Transthyretinが存在するときには、Aβ1-40,Aβ1-42ともにアミロイド線維が形成されなかった。2.ゲルろ過クロマトグラフィーによるtransthyretinとAβの相互作用解析Aβ1-40溶液にtransthyretinを加えると、Aβオリゴマーのピークは影響を受けなかったが、モノマーのピーク強度が減少した。これらの結果から、transthyretinはAβのモノマーに結合しアミロイド線維へ凝集することを阻害していると考えられる。3.Gelsolinフラグメントの大量発現系の構築とAβとの相互作用解析Gelsolinの178-293残基(gelsolin178-293)がAβに結合しているのではないかと予想し、gelsolin178-293フラグメントの大量発現系の構築に取り組んだ。gelsolin178-293とAβの結合をBIACOREによって調べたところ、解離定数が6.8×10^<-6> (M)の弱い結合であることが分かった。

The main component of the protein is amyloid β - peptide (Aβ), which is 40 residues high. In this study, we investigated the interaction between Aβ binding proteins, transthyretin, gelsolin, anti-beta antibodies and Aβ. 1. Atomic Force Microscopy (AFM) is used to analyze the interaction between Aβ1-42 and Aβ1-42. The linear dimension of Aβ1-42 is about 15nm in amplitude and tens to hundreds of nm in length. Aβ1-40 and Aβ1-42 have similar linear dimensions, forming a small amount of linear dimensions. Transthyretin is present in the form of A β1-40,A β 1 - 42 and Aβ1-42. 2. Analysis of the interaction between Aβ1-40 solution and A β1-40 solution. The result is that transhyretin binds to Aβ and inhibits aggregation of A β. 3. The construction of a large amount of development system of Gelsolin and the interaction analysis of Gelsolin residues 178-293 (gelsolin residues 178 - 293) with A β. gelsolin178-293 Aβ<-6>