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魚類由来アミロイド線維成長阻害タンパク質の作用機構

鱼源淀粉样原纤维生长抑制蛋白的作用机制

基本信息

批准号：
17657037
负责人：
水口峰之
金额：
$ 2.24万
依托单位：
University of Toyama
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

アミロイドβペプチド(Aβ)は、39〜43残基からなるペプチドでありアミロイド線維となることでアルツハイマー病を引き起こす。低温環境で生息する魚類がもつ不凍タンパク質RDIIIは氷結晶の成長を妨げる機能を有する。前年度までの研究により、RDIIIはAβのアミロイド線維形成を阻害することが示されている。本研究では、RDIIIタンパク質がどのようにアミロイド線維形成を阻害するのかについて核磁気共鳴(NMR)等の手法を用いて研究する。1.RDIIIタンパク質の主鎖連鎖帰属前年度に引き続きRDIIIの^<13>C/^<15>Nラベル体を準備した。得られた^<13>C/^<15>Nラベル体を用いて、HNCAやCBCANHなどのNMRスペクトルを測定し主鎖連鎖帰属を行りた。主鎖連鎖帰属は従来の方法を用いて行った。2.RDIIIタンパク質とAβの相互作用解析RDIIIの^<15>Nラベル体を使って、RDIIIとAβの相互作用解析を行った。Aβモノマーが存在する条件下において^<15>Nラベル体のHSQCスペクトルを測定し、AβフリーのHSQCと比較した。その結果、ケミカルシフトやピーク強度に有意な変化は認められなかった。しかし、これら2つのNMRサンプルを低温で2週間以上インキュベーションすると、Aβ存在下におけるRDIIIのN末端10残基程度にシグナル強度の変化が認められた。Aβは、モノマー状態で長時間インキュベーションすると凝集して短い線維(線維核)となり、さらにAβモノマーの結合が進み伸張することによってアミロイド線維になることがわかっている。長時間のインキュベーションによってAβ存在下のRDIIIにスペクトル変化が生じたのは、RDIIIが線維核に結合していることを表していると考えられる。

A β (Aβ) residues 39 ~ 43 are selected from the group consisting of residues A β (Aβ) and A β (A β). Fish that live in low temperature environments do not freeze. RDIII has the ability to inhibit crystallization and growth. In the previous year's study, RDIII showed that Aβ was inhibited from forming linear dimensions. In this study, we studied the application of methods such as nuclear magnetic resonance (NMR) to the prevention of linear dimension formation. 1. RDIII quality of the main lock chain of the previous year, the introduction of RDIII of the ^<13>C/^<15>N family preparation C<13>/<15>N/C/C The main lock chain belongs to the method of reverse transmission. 2. Analysis of the interaction between RDIII and A <15>βThe <15>HSQC of Aβ is measured and compared in the presence of Aβ. The result is that the intensity of the reaction is intentionally changed. The intensity of the N-terminal 10 residues of RDIII in the presence of Aβ was determined at low temperatures of more than 2 weeks. Aβ is in A state of aggregation for a long time, aggregation for a short linear dimension (linear nucleus), and aggregation for a long time. In the presence of Aβ, RDIII is a kind of linear nucleus.