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マウス個体を用いたmab21遺伝子群の機能解析

使用小鼠个体进行 mab21 基因组的功能分析

基本信息

批准号：
16027214
负责人：
高橋直樹
金额：
$ 3.84万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16027214/
关键词：
発生分化動物遺伝子組織発現制御

项目摘要

mab21l1ノックアウトマウスの解析mab21l1ノックアウトホモ個体雄は野生型雌マウスとの間でも子供を作らない。ノックアウト雌もほぼ不妊であるが、きわめて低い頻度で野生型雄マウスとの間に子供を作ることが明らかになった。しかし、この子供は生後2日以内にすべて死亡していることから、母マウスの母性行動の異常が考えられる。不妊の原因は、試験管内授精の結果から、雄、雌共に生殖細胞の形成は正常であると考えられること、雄の包皮腺に形成異常があること、mab21l1遺伝子の発現が、鋤鼻器官、副嗅球、扁桃体、視床などの鋤鼻嗅覚神経系で観察されることなどから、性行動の異常によるものと考えて、上記の組織で特異的に発現している遺伝子群のノックアウトマウスでの発現解析を進めている。mab21遺伝子産物の機能解析mab21遺伝子産物にはこれまでに報告されているモチーフ等が全くなく、アミノ酸配列等からその生化学的機能を予測することはできない。そこで、mab21遺伝子産物の分子機能を明らかにするためにいくつかの実験をおこなった。mab21遺伝子産物に対する特異的抗体を用いた解析から、mab21蛋白は、マウス個体組織中で核に局在していることが明らかになった。また、mab21遺伝子の強制発現実験から、mab21蛋白は培養細胞内でも主として核に局在することが明らかになった。さらに、GSTタグを結合したmab21遺伝子産物を用いて精製した蛋白群を質量分析機を用いた解析を行った結果、mab21遺伝子産物と相互作用する蛋白として、importin, transportin, Sam68などの蛋白やRNAの細胞内輸送に関わるいくつかの蛋白や、Prl, LIM, Etsファミリーなどに属する多くの転写因子が同定された。これらの遺伝子産物との機能的相互作用を解析するため、培養細胞を用いた遺伝子導入実験をおこなったところ、mab21遺伝子産物は、遺伝子発現調節およびRNAの輸送に関わっていることが明らかになった。

Mob 21 l1 The frequency of the wild type male is very low. If the child dies within 2 days after birth, the mother's maternal behavior will be abnormal. The causes of non-pregnancy include: normal germ cell formation in male and female, abnormal preputial gland formation in male, abnormal germ cell formation in female, abnormal germ cell formation in male, The above organization is specific to the development of the genetic group and the development of the genetic analysis. Functional analysis of mob 21 gene products and biochemical function prediction of mob 21 gene products The molecular function of the product of mob 21 gene is clearly demonstrated. Mab21 protein products are analyzed by specific antibodies, and Mab21 protein is detected in individual tissues. The stress expression of mob 21 protein in cultured cells was studied. In addition, GST binding to mab21 protein products was refined using a mass analyzer to analyze protein group results, mab21 protein products and interactions with protein, importtin, transportin, Sam68 protein and RNA intracellular transport related to protein, Prl, LIM, Ets protein and RNA. Analysis of functional interactions between gene products and RNA delivery in cultured cells using gene introduction and regulation of gene production and gene expression