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転写因子のin vivo結合配列クローン化による標的遺伝子同定法の開発

転写因子のin vivo結合配列クローン化による標的遺伝子同定法の開発
通过转录因子体内结合序列克隆开发靶基因鉴定方法
批准号：
08283215
负责人：
高橋 直樹
金额：
$1.34万
依托单位：
Nara Institute of Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1996 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08283215/
关键词：
転写因子標的遺伝子ホメオボックスクロマチンゲノム研究

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项目成果

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我々はこれまでにマウスホメオボックス遺伝子を用いて、転写因子のin vivo結合配列をマウス胎児クロマチンより精製クローン化し、その近傍に存在する標的遺伝子を同定することによって、ホメオボックス遺伝子の発生過程における機能を分子レベルで明らかにしてきた。この方法で最も時間と手間のかかるステップは、クローン化したin vivo結合配列の近傍に存在する標的遺伝子の同定であるが、ヒトや線虫のゲノム計画によってゲノムの全塩基配列が決定されれば、転写因子のin vivo結合配列をクローン化すると同時に標的遺伝子が同定されることになり、研究の速度を何十倍にも速めることが出来る。本研究はこのような研究法を確立することを目指し、マウスで用いた方法が、ヒトや線虫にも応用可能であるかを検討した。ヒトEC細胞NT2/D1はヒト胎児の性質の少なくとも一部は持っており、ホメオボックス(Hox)など発生に関わる遺伝子の発現が報告されている。このEC細胞をレチノイン酸処理し、HoxB1遺伝子の発現を誘導した後、HoxB1のin vivo結合配列の濃縮を行った。濃縮したDNAをベクターに組み込み、ライブラリーを作製した。このライブラリー中にHoxB1の自己遺伝子の発現にかかわると考えられる配列が濃縮されているかどうかを、ハイブリダイゼーションによって調べたが、自己遺伝子の発現調節にかかわる配列の濃縮は検出されなかった。よりゲノムサイズの小さい線虫を用いた標的遺伝子単離法の検討のため、線虫Hox遺伝子lin39、mab5、eg15の遺伝子産物を大腸菌発現ベクターを用いて作製し、これを抗原とした抗体の調製を行った。これらの抗体は特異的にその抗原を認識することを確認した。
期刊论文(10)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
高橋直樹: "ハエとマウスの癌抑制遺伝子" Molecular Medieine. 33. 768-773 (1996)
Naoki Takahashi：“果蝇和小鼠中的肿瘤抑制基因”《分子医学》33. 768-773 (1996)。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
T.Ito et.al.: "A Serine/Threonine Protein Kinase Gene Isolated by an in vivo Birding Procedute Using the Arabidopsis Floral Homeotie Gene Product,AGAMOUS." Plant and Cell Physiology. (in press). (1997)
T.Ito 等人：“使用拟南芥花同源基因产物 AGAMOUS 通过体内观鸟程序分离出丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
H.Shoji et.al.: "Regionalized Expression of the Dbx Family Homeobox Genes in the Embryonic CNS of the Mouse." Mechanisms of Development. 56. 25-39 (1996)
H.Shoji 等人：“Dbx 家族同源盒基因在小鼠胚胎中枢神经系统中的区域化表达”。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
高橋直樹: "Hox遺伝子産物による転写調節機構" 蛋白質・核酸・酵素. 41. 1088-1094 (1996)
Naoki Takahashi：“Hox 基因产物的转录调控机制”蛋白质/核酸/酶。41. 1088-1094 (1996)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
データ伝送エネルギーコスト低減を目指す高効率Si基板上半導体薄膜レーザ実現
  • 批准号：
    23KJ0935
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $1.15万
  • 财政年份：
    2023
  • 负责人：
    高橋 直樹
  • 依托单位：
    Tokyo Institute of Technology
食品に含まれる催奇性の新しい検出法の開発
  • 批准号：
    19658051
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $2.24万
  • 财政年份：
    2007
  • 负责人：
    高橋 直樹
  • 依托单位：
    The University of Tokyo
Mab21遺伝子の性行動制御機構の解明
  • 批准号：
    19040005
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $4.16万
  • 财政年份：
    2007
  • 负责人：
    高橋 直樹
  • 依托单位：
    The University of Tokyo
2光子励起顕微鏡によるinvivo観察のための固定具の開発
  • 批准号：
    18920006
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
  • 资助金额：
    $0.42万
  • 财政年份：
    2006
  • 负责人：
    高橋 直樹
  • 依托单位：
    生理学研究所 技術課
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