分化多能性維持に必須の転写因子Nanogの機能解析

Nanog 的功能分析，一种维持多能性所必需的转录因子

• 批准号: 16027232
• 负责人: 山中 伸弥
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Kyoto University (2005)Nara Institute of Science and Technology (2004)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16027232/
• 关键词: ES細胞; 分化多能性; ノックアウトマウス; ホメオボックス; 遺伝子ノックアウト

哺乳動物の受精卵は分化全能性を保ったまま卵割を繰り返すが、桑実胚から胚盤胞への過程で細胞は分化細胞である栄養外胚葉もしくは分化多能性を維持する内部細胞塊へと変化する。内部細胞塊においては引き続き2回目の運命決定が起こり、細胞は原始内胚葉へと分化するか、原始外胚葉(エピブラスト)として分化多能性を維持する。発生初期において分化多能性が維持される分子機構はほとんどわかっていない。胚性幹細胞(ES細胞)は胚盤胞に由来する幹細胞で、分化多能性を維持したまま、半永久的に増殖する。これまで、ホメオボックス転写因子Nanogは分化多能性の維持に必須であることを報告した。本研究の目的はNanogの発現を規定する上流因子、Nanogと複合体を形成する蛋白質因子、そしてNanogにより転写調節される標的遺伝子を同定することである。1.Nanogの生体における発現様式の解析 Nanogの遺伝子座に緑色蛍光蛋白質(GFP)をノックインした大腸菌人工染色体(BAC)をES細胞に導入し、さらにマウスを作製した。このES細胞やマウスをもちいて分化、発生にともなうNanogの発現動態を可視化した。2.Nanog遺伝子の調整領域の解明 レポーター遺伝子解析によりES細胞特異的発現に必要なエンハンサー配列を同定しOct4とSox2の2つの転写因子が重要であることを見いだした。3.Nanogの標的遺伝子探索 未分化状態がSTAT3により維持されているES細胞と、Nanogにより維持されている細胞との間で、DNAマイクロアレー解析を行い、NanogとSTAT3の標的候補を多数同定した。これらについて真に標的遺伝子であるかを検討した。4.Nanogの複合体解析 アフィニティー精製によりNanog結合蛋白質の探索を行った。

The lactating animal "zygote" differentiation totipotency is protected, the oocytes are cut, the embryos are returned, the morula embryos are divided into cells, the cells are differentiated, the ectoderm cells are differentiated, the pluripotency is maintained, and the internal cells of the embryos are differentiated. The fate of the two cells determines the differentiation of the primordial endoderm, the differentiation of the primordial endoderm, and the differentiation and maintenance of the primitive ectoderm. In the early stage of life, we should differentiate the pluripotency and maintain the molecular mechanism of this disease. Embryogenic germ cell (ES cell) the origin of embryogenic cell, differentiation and pluripotent cell maintenance, semi-permanent colonization. It is necessary to improve the reporting performance of the Nanog differentiating pluripotency factor. The purpose of this study is to observe the regulation of the upstream factor, the Nanog complex to form the protein factor, and the Nanog gene to write the data in the same way. The 1.Nanog artificial chromosome (BAC), the ES cell, the cell, the color, the color, the light protein (GFP), the color, the color, the The ES cells do not differentiate, and the Nanog cells show that they can be changed. In the whole domain of 2.Nanog, it is necessary to find out that it is necessary to find the necessary information in the whole domain. In the analysis of the ES cell, it is necessary to match the Oct4 Sox2 2 writing factor. The undifferentiated status of the 3.Nanog cluster is explored. The STAT3 cluster maintains the ES cell, the Nanog cluster maintains the cell cycle, the DNA cluster parses the cell, and most of the candidates of the Nanog cluster agree with each other. The child of the real girl, the child of the real girl, has a lot of trouble. The 4.Nanog complex was used to analyze the Nanog binding protein.

项目成果

Differential roles for Sox15 and Sox2 in transcriptional control in mouse embryonic stem cells

• DOI: 10.1074/jbc.m501423200
• 发表时间: 2005-07-01
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Maruyama, M;Ichisaka, T;Yamanaka, S
• 通讯作者: Yamanaka, S

mTOR is essential for growth and proliferation in early mouse embryos and embryonic stem cells

• DOI: 10.1128/mcb.24.15.6710-6718.2004
• 发表时间: 2004-08-01
• 期刊: MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY
• 影响因子: 5.3
• 作者: Murakami, M;Ichisaka, T;Yamanaka, S
• 通讯作者: Yamanaka, S

Multiple functions of Jab1 are required for early embryonic development and growth potential in mice

• DOI: 10.1074/jbc.m406559200
• 发表时间: 2004-10-08
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Tomoda, K;Yoneda-Kato, N;Kato, Y
• 通讯作者: Kato, Y

Evolutionarily Conserved Non-AUG Translation Initiation in NAT1/p97/DAPS (EIF4G2)

NAT1/p97/DAPS (EIF4G2) 中进化保守的非 AUG 翻译起始

• 发表时间: 2005
• 期刊: Genomics 85
• 作者: Yamaguchi;M.;Hirose;F.;Inoue Y.H.;Ohno;K.;Yoshida;H.;Hayashi;Takahashi K.;Maruyama M.;Takahashi K.;Takahashi K
• 通讯作者: Takahashi K

A Protein Secreted by Visceral Fat that Mimics the Effects of Insulin.

一种由内脏脂肪分泌的蛋白质，模仿胰岛素的作用。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Science 307
• 作者: Saito;T.T.;Tougan;T.;Kasama;T.;Okuzaki;D.;Nojima;H.;Takahashi K;Fukuhara A
• 通讯作者: Fukuhara A