脳内ケモカインによるグリア-ニューロン機能連関の時間的・空間的調節機構の解明

阐明脑内趋化因子对神经胶质-神经元功能连接的时空调节机制

基本信息

批准号：
16047216
负责人：
南雅文
金额：
$ 4.74万
依托单位：
Hokkaido University (2005)Kyoto University (2004)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

前年度の研究において、大脳皮質-線条体培養切片において、ATPγS処置によるアストロサイトでのMCP-1産生・遊離亢進に対する各種MAPキナーゼ阻害薬の効果について検討したところ、ATPγSによるMCP-1産生・遊離亢進には、MEK/ERKカスケードの活性化が重要な働きをしていることが明らかとなった。さらに、NMDAによる神経細胞傷害により惹起されるアストロサイトでのMCP-1産生・遊離亢進についても各種MAPキナーゼ阻害薬を用いた同様の検討により、、MEK/ERKカスケード活性化が重要であることが示された。そこで、NMDAによる神経細胞傷害時のMEK/ERKカスケード活性化をERKリン酸化亢進を指標として検討したところ、NMDA処置30分以内の早い時間帯では神経細胞において、1時間以後の遅い時間帯ではアストロサイトにおいてERKリン酸化の亢進が観察された。NMDA処置終了後3時間の時点でのMEK阻害薬の添加によってもMCP-1産生・遊離亢進が抑制されたことから、アストロサイトでのMEK/ERKカスケード活性化が重要であることが示唆された。前年度に構築した、神経-グリア共培養系中のアストロサイトにEGFPを発現させることによりアストロサイト形態を経時的に観察することが可能な実験系を用いて、NMDA処置による神経細胞傷害時のアストロサイト形態変化におけるMEK/ERKカスケード活性化の役割を、MCP-1産生・遊離亢進における役割と平行して解析した。MEK阻害薬は、本培養系においてもMCP-1産生・遊離亢進を抑制したが、アストロサイト形態変化に対する有意な効果は認められなかったことから、神経細胞傷害時のアストロサイト形態変化にはMEK/ERKカスケード以外の細胞内情報伝達系が関与していることが示唆された。

在上一年的研究中，我们研究了各种MAP激酶抑制剂对ATPγS在星形胶质细胞上增加和释放ATPγ在脑皮质层状培养切片中的影响，并且发现MEK/ERK级联对MCP-1通过增加MCP-1的生产和发行中的MEK/ERK Cascade的激活在PPγS的产生和发行中起重要作用。此外，使用各种MAP激酶抑制剂的类似研究表明，MEK/ERK级联激活对于由NMDA引起的神经元损伤引起的星形胶质细胞中MCP-1的产生和释放至关重要。因此，当使用ERK磷酸化升高的指数研究NMDA神经元损伤期间的MEK/ERK级联激活时，在NMDA处理的30分钟内，在NMDA处理的早期，在1小时或更晚后，在NMDA处理的30分钟内，在NMDA处理的30分钟内，在NMDA治疗的30分钟内观察到ERK磷酸化的增加。 NMDA治疗结束后3小时增加MEK抑制剂也抑制了MCP-1的产生和释放，这表明星形胶质细胞处的MEK/ERK级联激活激活很重要。使用上一年构建的实验系统，该系统允许EGFP在神经胶质性共培养系统中的星形胶质细胞中表达，该系统可以随着时间的流逝观察星形胶质细胞的形态，我们分析了MEK/ERK级联反应激活在NMDA和NMDA引起的神经元损伤中的变化中，与该角色相关的角色越来越多地释放，该作用是由NMDA释放引起的。尽管MEK抑制剂抑制了主要培养系统中MCP-1的产生和释放的增加，但对星形胶质形态的变化没有明显影响，这表明除MEK/ERK级联反应以外的其他细胞内信号传导系统与神经元损伤过程中星形胶质细胞形态的变化有关。