発がん物質による転写活性化過程の単一生細胞内イメージング

致癌物转录激活过程的单活细胞成像

• 批准号: 17013010
• 负责人: 十川 和博
• 金额: $ 4.61万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17013010/
• 关键词: CYP1A2; LBP-1; ヘテロダイマー; 核移行シグナル; FRET

CYP1A2遺伝子の外来異物による活性化にXREIIと名づけたエンハンサーが必要であり、LBP-1a,LBP-1b,LBP-1cが直接結合し、さらにAhリセプターとArntのヘテロダイマーがコアクティベーター様に作用することはすでに報告した。本研究ではこの3つのLBP-1分子種のうち、LBP-1bのみが、核移行シグナルをもち、単独でホモダイマーを形成し、核移行後、転写を活性化することを見出した。さらに、LBP-1aとLBP-1cは核移行シグナルをもたず、LBP-1bとヘテロダイマーを形成し、核移行することが判明した。LBP-1bは強い転写活性化活性をもつが、LBP-1a,LBP-1cを核内で強制発現しレポーター活性を調べたところ、どちらの因子も転写活性をもたないことが判明した。ただ、この結果はレポーターのプロモーター構造に依存している可能性があるので、さらに詳しく調べる予定である。LBP-1bの核移行シグナルを解析したところ、LBP-1bに特異的なエキソン6にコードされている36アミノ酸に存在し、塩基性アミノ酸クラスターが二つに分かれた双極性シグナルであることが分かった。LBP-1aとLBP-1bは核内でスペックルを形成し、免疫染色の結果、この小体はPMLボディーであることが分かった。さらに、多数の欠失変異体を作成し、PML局在化領域を調べたところ、LBP-1aのN末端側に存在することが判明した。FLIM-FRETにより生細胞で転写因子間相互作用を調べた。ArntはPMLボディーに局在し、陽性のシグナルを与えた。核でArntがホモダイマーを形成していると推定した。さらに、低酸素ストレスに対する遺伝子応答に重要であるVBC複合体構成タンパク質間の相互作用を調べたところ、陽性のFRETシグナルを構成タンパク質間で計測できた。

CYP1A2 gene is activated by foreign substances. XREII and LBP-1a,LBP-1b and LBP-1c are required to bind directly to each other. In this study, we found that LBP-1 molecular species, LBP-1b molecular species, nuclear migration, single cell formation, nuclear migration, and gene activation were detected. LBP-1a and LBP-1c were identified for nuclear migration. LBP-1b was identified for nuclear migration. LBP-1b, LBP-1a and LBP-1c are both active under nuclear stress. The result of this analysis is that the probability of structural dependence is determined in detail. LBP-1b nuclear migration analysis, LBP-1b specific analysis, L LBP-1a and LBP-1b are both nuclear and immunostaining results. In addition, most of the missing genes were produced, and the PML was found to exist in the N-terminal side of LBP-1a. FLIM-FRET mediates interactions between growth factors. Arnt Arnt. The VBC complex is composed of the following components: the interaction between the two substances, the modulation of the interaction between the two substances, and the measurement of the interaction between the two substances.

项目成果

In vitro photodynamic effects of phthalocyaninatosillcon covalently linked to 2,2,6,6-tetramethyl-1-piperidinyloxy radicals on cancer cells

共价连接2,2,6,6-四甲基-1-哌啶氧基自由基的酞菁硅对癌细胞的体外光动力作用

• 发表时间: 2005
• 期刊: Free Radical Biology & Medicine 38
• 作者: Hatakeyama;M.;Fuyuhiko Sato;畠山昌則;Takeda K.;Kazuyuki Ishii
• 通讯作者: Kazuyuki Ishii

Heterodimerization with LBP-1b is necessary for nuclear localization of LBP-1a and LBP-1c

与 LBP-1b 的异二聚化对于 LBP-1a 和 LBP-1c 的核定位是必要的

• 发表时间: 2005
• 期刊: Genes to cells 10
• 作者: Hatakeyama;M.;Fuyuhiko Sato
• 通讯作者: Fuyuhiko Sato

Application of time- and space-resolved fluorescence spectroscopy to the distribution of guest species into micrometer-sized zeolite crystals

应用时间和空间分辨荧光光谱将客体物质分布到微米尺寸的沸石晶体中

• 发表时间: 2006
• 期刊: Phys. Chem. Chem. Phys 8・12
• 作者: K.Yamada;H.Nakamura;S.Matsushima;H.Yamane;T.Haishi;K.Kuamda;Hiroshi Kominami;古南 博;Hiroshi Kominami;古南 博;Hiroshi Kominami;Hiroshi Kominami;Hiroshi Kominami;S.Hashimoto;橋本修一;S.Hashimoto
• 通讯作者: S.Hashimoto