FRETによる単一生細胞でのPMLボディ生理機能の可視化

通过 FRET 可视化单个活细胞中的 PML 身体生理学

• 批准号: 17050002
• 负责人: 十川 和博
• 金额: $ 4.03万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17050002/
• 关键词: 可視化; 蛋白質; FLIM-FRET; VBC複合体; タンパク間相互作用

PMLボディは未知の機能をもつ核内ボディのひとつであるが,転写因子や転写介在因子などが局在することが報告されている。この構造を解明するための第一歩としてPMLボディ局在性のArntとLBP-1bを用いてFLIM-FRETにより以下の解析を行った。ArntはPASドメインとHLHモチーフをもち,それらによりAhリセプターやHIF-1αなどとヘテロダイマーを形成し,DNAに結合する核局在の転写因子である。COS-7細胞で一過性に発現すると,スペックル状に分布しPMLボディと一致した。ArntにCeruleanとCitrineを接合し,その間のFRETを観測した。PMしボディを大,中,小の大きさで3つに分類し,それぞれからのFRETシグナルを計測したところ,サイズによるシグナルの強弱は認められなかった。スペックルを形成せず,核に一様に分布している細胞サンプルからはFRETシグナルはほとんど計測されなかった。LBP-1bにCeruleanとCitrineを接合し,FRETシグナルを調べたところ,やはりPMLボディから,強いシグナルを計測した。核質に分布しているLBP-1bからのシグナルは弱かった。ArntもLBP-1bもホモダイマーを形成することが報告されているので,PMLボディからのFRETシグナルは,そこでダイマーを形成している可能性が考えられた。単なる凝集によるFRETの可能性も排除できず,今後二量体形成に必要な領域の欠失体を発現し,どちらの可能性が正しいか決定する予定である。

PML The first step of structural analysis is to analyze the structure of FLIM-FRET and LBP-1b. Arnt PAS is the most important factor in the formation of HIF-1α and DNA binding. COS-7 cells were found to be transient and distributed uniformly. Arnt Cerulean and Citrine are joined, and FRET is measured in between. PM is divided into three categories: large, medium and small, and all of them are measured by FRET. In the first place, there is a large number of people in the world who are interested in the development of science and technology, such as science and technology. LBP-1b is connected to Cerulean and Citrine,FRET is adjusted, and PML is displayed, and strong control is measured. Nuclear cytoplasmic distribution: LBP-1b Arnt BP-1b The possibility of FRET aggregation is excluded, and the possibility of loss in the necessary areas for the formation of the next two molecules is determined.

项目成果

Application of time- and space-resolved fluorescence spectroscopy to the distribution of guest species into micrometer-sized zeolite crystals

应用时间和空间分辨荧光光谱将客体物质分布到微米尺寸的沸石晶体中

• 发表时间: 2006
• 期刊: Phys. Chem. Chem. Phys 8・12
• 作者: K.Yamada;H.Nakamura;S.Matsushima;H.Yamane;T.Haishi;K.Kuamda;Hiroshi Kominami;古南 博;Hiroshi Kominami;古南 博;Hiroshi Kominami;Hiroshi Kominami;Hiroshi Kominami;S.Hashimoto;橋本修一;S.Hashimoto
• 通讯作者: S.Hashimoto

Heterodimerization with LBP-1b is necessary for nuclear localization of LBP-la and LBP-1c

与 LBP-1b 的异二聚化对于 LBP-1a 和 LBP-1c 的核定位是必要的

• 发表时间: 2005
• 期刊: Genes to cells 10
• 作者: Nobuhisa I;Takeya R;Ogura K;Ueno N;Kohda D;Inagaki F;Sumimoto H.;Fuyuhiko Sato
• 通讯作者: Fuyuhiko Sato

Identification of amino acid residues in the Ah receptor involved in ligand binding

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2006.12.227
• 发表时间: 2007-03-09
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Goryo, Kenji;Suzuki, Ai;Sogawa, Kazuhiro
• 通讯作者: Sogawa, Kazuhiro

In vitro photodynamic effects of phthalocyaninatosilicon covalently linked to 2,2,6,6-tetramethyl-1-piperidinyloxy radicals on cancer cells

共价连接2,2,6,6-四甲基-1-哌啶氧基自由基的酞菁硅对癌细胞的体外光动力效应

• 发表时间: 2005
• 期刊: Free Radical Biology & Medicine 38
• 作者: Shiojiri;K.;Takabayashi;J.;Kazuyuki Ishii
• 通讯作者: Kazuyuki Ishii