生細胞でのAhリセプター転写複合体のイメージングと活性化機構

活细胞中Ah受体转录复合物的成像和激活机制

基本信息

  • 批准号:
    18012005
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 6.66万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    2006
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2006 至 2007
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

FRETペアであるCeruleanとCitrineをLBP-1a,LBP-1b,LBP-1cのC末端に結合し培養生細胞で発現した。細胞質に局在するLBP-1aとLBP-cホモダイマー,LBP-1aとLBP-1cのヘテロダイマー間のFRETをCeruleanの蛍光寿命短縮とCitrine蛍光寿命曲線のライズにより観察したところ,強いFRETシグナルが観察できた。LBP-1bホモダイマー間のFRETも同様に計測できた。LBP-1c-CitrineとLBP-1a-CeruleanとLBP-1bを共発現し,LBP-1bにより核内に移行したLBP-1aとLBP-1c間のFRETを計測したところ,細胞質と同様にFRETシグナルが観察できた。この結果はLBP-1bとヘテロダイマーを形成することにより,核内に移行したLBP-1aとLBP-1cが,核内でヘテロダイマーを再形成することができることを示している。Arntは核局在の転写因子であるが,少なくとも培養細胞でトランスフェクションにより発現した場合PMLボディに局在する細胞が見られる。Arntに上記のFRETペア蛍光タンパク質を融合し,発現したところ,PMLボディに局在するときのみ,FRETが観察された。この結果からArntはホモダイマーを形成するが,生細胞核内ではホモダイマーとしては存在していないことが示唆された。また,Arnt欠失変異体のFLIM-FRET解析から,PMLボディでのFRETも,ホモダイマーからの結果でないことが推測された。
FRETペアであるCeruleanとCitrineをLBP-1a,LBP-1b,LBP-1c <s:1> c-terminal に binding to the lb-cultured biological cells で shows <s:1> た. Cytoplasm に bureau in す る LBP - 1 a と LBP -c ホ モ ダ イ マ ー, a と LBP LBP - 1-1 c の ヘ テ ロ ダ イ マ ー between の FRET を Cerulean の 蛍 light life shortening と Citrine 蛍 light life curve の ラ イ ズ に よ り 観 examine し た と こ ろ, strong い FRET シ グ ナ ル が 観 examine で き た. The LBP-1bホモダ ホモダ に に measure で た た. LBP - 1 c - Citrine と LBP - 1 a - Cerulean と LBP - 1 b を 発 し now, total of LBP - 1 b に よ り intranuclear に transitional し た LBP - 1 a と between LBP and 1 c の FRET を measuring し た と こ ろ, with others in the cytoplasm と に FRET シ グ ナ ル が 観 examine で き た. こ の results は LBP - 1 b と ヘ テ ロ ダ イ マ ー を form す る こ と に よ り, intranuclear に transitional し た LBP - 1 a と LBP - 1 c が, intranuclear で ヘ テ ロ ダ イ マ ー を reformulation す る こ と が で き る こ と を shown し て い る. Arnt は nuclear agency in の planning write factor で あ る が, less な く と も culture cell で ト ラ ン ス フ ェ ク シ ョ ン に よ り 発 now し た occasions PML ボ デ ィ に bureau in す る cells が see ら れ る. Arnt に written の FRET ペ ア 蛍 light タ ン パ ク し を fusion, 発 now し た と こ ろ, PML ボ デ ィ に bureau in す る と き の み, FRET が 観 examine さ れ た. こ の results か ら Arnt は ホ モ ダ イ マ ー を form す る が, born within the nucleus で は ホ モ ダ イ マ ー と し て は exist し て い な い こ と が in stopping さ れ た. ま た, Arnt owe - variant の FLIM - FRET parsing か ら, PML ボ デ ィ で の FRET も, ホ モ ダ イ マ ー か ら の results で な い こ と が speculation さ れ た.

项目成果

期刊论文数量(3)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Ternary complex formation of pVHL, elongin B and elongin C visualized in living cells by a fluorescence resonance energy transfer-fluo lifetime imaging micros copy technique
通过荧光共振能量转移-荧光寿命成像显微复制技术在活细胞中观察 pVHL、elongin B 和 elongin C 三元复合物的形成
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Jormakka;M.;Yokoyama;K.;Yano;T.;Tamakoshi;M.;Akimoto;S.;Shimamura;T.;Curmi;P.;and Iwata;S;Koshi Kinoshita
  • 通讯作者:
    Koshi Kinoshita
培養細胞の核内におけるArntのFLIM-FRET解析
培养细胞核中 Arnt 的 FLIM-FRET 分析
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    嶋田透;嶋田正和;竹田敏;鎮西康雄;寺山守;山元大輔;御領 憲治
  • 通讯作者:
    御領 憲治
Identification of amino acid residues in the Ah receptor involved in ligand binding
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十川 和博其他文献

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発がん物質による転写活性化過程の単一生細胞内イメージング
致癌物转录激活过程的单活细胞成像
  • 批准号:
    17013010
  • 财政年份:
    2005
  • 资助金额:
    $ 6.66万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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    17050002
  • 财政年份:
    2005
  • 资助金额:
    $ 6.66万
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    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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    11138209
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    1999
  • 资助金额:
    $ 6.66万
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    10151203
  • 财政年份:
    1998
  • 资助金额:
    $ 6.66万
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    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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  • 批准号:
    06280202
  • 财政年份:
    1996
  • 资助金额:
    $ 6.66万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
ツ-ハイブリッド系によるArnt及びPASタンパク質に結合する因子の単離
使用双杂交系统分离与 Arnt 和 PAS 蛋白结合的因子
  • 批准号:
    08680672
  • 财政年份:
    1996
  • 资助金额:
    $ 6.66万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
薬物代謝酵素の外来異物による誘導に関するタンパク質リン酸化機構の解明
阐明与异物诱导药物代谢酶相关的蛋白质磷酸化机制
  • 批准号:
    07680669
  • 财政年份:
    1995
  • 资助金额:
    $ 6.66万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
精製した転写因子を用いたP4501A1遺伝子の誘導的発現のインビトロ解析
使用纯化的转录因子体外分析 P4501A1 基因的诱导表达
  • 批准号:
    06680601
  • 财政年份:
    1994
  • 资助金额:
    $ 6.66万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
薬物代謝型Pー450遺伝子に働く転写調節因子の機能解析
作用于药物代谢 P-450 基因的转录调节因子的功能分析
  • 批准号:
    03680161
  • 财政年份:
    1991
  • 资助金额:
    $ 6.66万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
薬物誘導型Pー450遺伝子プロモ-タ-に働く転写因子の解析
药物诱导的P-450基因启动子转录因子分析
  • 批准号:
    02680149
  • 财政年份:
    1990
  • 资助金额:
    $ 6.66万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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