マウス胚前後軸形成に於けるWntの発現制御機構の解析

小鼠胚胎前后轴形成过程中Wnt表达调控机制分析

• 批准号: 18055025
• 负责人: 目野 主税
• 金额: $ 5.18万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18055025/
• 关键词: 前後軸; マウス胚; 遺伝子発現制御

Wnt3,Wnt3aは原条領域で発現する分泌因子であり、Wnt3-/-胚では前方臓側内胚葉が存在するが原条が形成されないことが知られている。Wnt3はNodalシグナルを受けて発現することから、Wnt3発現はNodalシグナルを担う転写因子によって直接制御されている可能性が考えられる。また、Wnt3aの発現はWnt3発現が消失する頃から開始し、原条領域には持続的にWntシグナルが供給され中胚葉が生み出される。このようなNoda1を頂点とする胚後方化カスケードの全体像を明らかにするために、本年度はWnt3及びWnt3aの発現制御領域の解析に取り組んだ。Wnt3及びWnt3aの発現制御領域の解析は、以下のようにトランスジェニックマウス法によって行った。それぞれのプロモーター領域もしくはhspプロモーター下に1acZを置き、rVistaによる種間相同領域(ECR)を参考にしてゲノム領域を連結した様々なコンストラクトを作成した。過排卵処理した♀B6C3F1から受精卵を採取し、前核にこれらのコンストラクトを注入した。E6.75もしくはE7.75で胚を回収し、X-Ga1染色でエンハンサー活性を評価した。その結果、Wnt3については原条領域で活性を有する約6kbpのゲノム断片と胚後方の臓側内胚様でエンハンサー活性を有するゲノム断片を得た。Wnt3は、原条領域の発現に先立って胚後方内胚様で発現することから、エンハンサーも分離して存在していると考えられる。腕3aについては原条領域全体でエンハンサー活性を持つゲノム領域を約1kbpまで絞ることが出来た。さらに、原条領域の後部で活性を担う領域も見いだし、Wnt3の原条領域における発現は入れ子に制御されていることが示唆された。

Wnt3, Wnt3a are secreted in the protoplast domain, and Wnt3-/-embryos are secreted in the endoplast domain. Wnt3 is a nodal factor that directly controls the possibility of Wnt3 generating nodal factors. Wnt 3a appears and disappears. Wnt 3a appears and disappears. The analysis of the occurrence control field of Wnt3 and Wnt3a in this year is divided into two groups. The analysis of Wnt 3 and Wnt 3a's development control domain is as follows: The domain name of the domain name is 1acZ, and the domain name of the domain name is 1acZ. Ovulation treatment: B6 C3 F1: Fertilized eggs are collected, pre-nucleus injected and processed. E6.75-E7.75-E6.75-E6.75-E6.7 As a result, the activity of Wnt 3 in the original region was about 6 kbp, and the activity of Wnt 3 in the endosperm was about 6 kbp. Wnt 3, the original strip of the field of the emergence of the embryo after the embryo of the emergence of the first, the end of the separation of the existence of the examination 3a In addition, the activity of the rear part of the original field is displayed in the middle of the field, and the occurrence of the original field of Wnt 3 is controlled in the middle of the field.