細胞内移行シグナルとしてのBAAモチーフとそのシグナル伝達系における役割

BAA基序作为细胞内化信号及其在信号转导系统中的作用

• 批准号: 08260220
• 负责人: 谷口 寿章
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Fujita Health University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08260220/
• 关键词: 情報伝達; 一酸化窒素合成酵素; カルモジュリン; リン脂質

Cキナーゼの主要基質タンパク質であるMARCKSは、細胞外からの刺激に応じ、膜画分と細胞質画分間を移行することが知られている.またCキナーゼやホスホリパーゼC、一酸化窒素合成酵素(NOS)など、シグナル伝達系で重要な役割を果たしている多くのタンパク質も同様の現象を示す.我々はこの可逆性の膜結合機構を解明する過程で、MARCKSや同じファミリーに属するGAP-43がカルモジュリン結合部位でホスファチジルセリンなどの酸性リン脂質と特異的に結合し、その結合がリン酸化により可逆的に調節されることを見出し、さらに内皮細胞型のNOSにおいても、そのカルモジュリン結合部位が、酸性リン脂質の結合部位となっていることを明らかにした.本年度は内皮細胞型のNOSのカルモジュリン結合部位の立体構造を円偏光二色性、及び核磁気共鳴により解析した.その結果、水溶液中ではこの部位は完全なαヘリックス構造ではないが、nasoent(未熟な)αヘリックス構造とも言うべき構造を取り、カルモジュリンや酸性リン脂質との結合によってαヘリックス構造が安定化されることが明らかとなった.また、このペプチドがCキナーゼによりリン酸化されるとαヘリックス構造を取り難くなり、この結果としてカルモジュリン、リン脂質との相互作用減少すると考えられた.さらに他の2つのNOSのアイソザイムにおいても同様の部位がリン脂質結合部位となっており、NOSの細胞内局在、及びその活性調節においてBAAモチーフが重要な役割を果していることを明らかに出来た.

C. The main matrix of the protein is MARCKS, extracellular stimulation, membrane separation and cytoplasmic migration. C, an acid synthase (NOS), a protein synthase (NOS), and a protein synthase (NOS). The reversible membrane-binding mechanism of MARCKS and GAP-43 is responsible for the reversible regulation of the membrane-binding mechanism of endothelial cell-type NOS. Acid lipid binding site This year, we analyzed the three-dimensional structure of the endothelial cell type NOS binding site using polarization dichroism and nuclear magnetic resonance. As a result, in aqueous solution, the structure of the structure is completely different from that of the structure. The results of this study include a reduction in lipid interaction between the two groups. In addition, the lipid binding sites, NOS intracellular localization, and NOS activity regulation sites are important for the regulation of NOS activity.

项目成果

A.Miegel,et al.: "Production and Crystallization of Lobster Muscle Tropomyosin Expressed in Sf9 Cells." FEBS Lett.394. 201-205 (1996)

A.Miegel 等人：“Sf9 细胞中表达的龙虾肌肉原肌球蛋白的生产和结晶”。

M.Matsubara,et al.: "Interaction of Calmodulin Binding Domain Peptides of Nitric Oxide Synthase with Membrane Phospholipids: Regulation by Protein Phosphorylation and Ca^<2+>-Calmodulin" Biochemistry. 35. 14651-14658 (1996)

M.Matsubara 等人：“一氧化氮合酶的钙调蛋白结合域肽与膜磷脂的相互作用：蛋白质磷酸化和 Ca^2-钙调蛋白的调节”生物化学。

N.Hayashi,et al.: "Circular Dichroism and ^1H Nuclear Magnetic Reasonance Studies on the Solution and Membrane Structure of GAP-43 Calmodulin-binding Domain." J.Biol.Chem.272. 7639-7645 (1997)

N.Hayashi 等人：“GAP-43 钙调蛋白结合域的溶液和膜结构的圆二色性和 ^1H 核磁推理研究”。

D.R.Marchak(編): "Techiniques in Protein Chemistry VIII(印刷中)" Academic Press New York, (1997)

D.R. Marchak（编辑）：“蛋白质化学技术 VIII（印刷中）”纽约学术出版社，（1997 年）