权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

精子幹細胞のニッシェ構成分子の機能的同定

精子干细胞中生态位组成分子的功能鉴定

基本信息

批准号：
20057009
负责人：
篠原美都
金额：
$ 6.34万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20057009/
关键词：
遺伝学発生・分化幹細胞細胞・組織

项目摘要

本研究は精巣の精子形成の元になる幹細胞(精子幹細胞)の移植時におけるニッシェへのホーミング機構に関与する分子メカニズムの解明を目標としている。これまでの研究で研究代表者らはβ1-インテグリンが関与することを同定した。β1-インテグリンは精子幹細胞に発現し、幹細胞ニッシェの基底膜への繋留に関与すると考えられる。一方、ホーミングは基底膜におけるニッシェへの繋留のみでなく、セルトリ細胞への接着やtight junctionの通過など、複数のステップが関与するプロセスであると考えられることから、本年度の研究では他の候補分子(特にrho, rac, cdc42などのG蛋白質シグナルやIntegrin・Cadherinファミリーなど)について調べた。(1) 培養精子幹細胞株(GS細胞)へrho, rac, cdc42変異体の遺伝子導入し、増殖活性や細胞外マトリクス(ラミニン)への接着性を調べたが、特に野生型と差はなかった。移植アッセイによりコロニー形成能についても差は無かった。一方、(2) conditionalノックアウトマウスより精巣細胞を回収し、試験管内でadenovirus (AxCACre)を暴露した後トリプシンで回収し不妊マウスの精巣内へ移植し、コロニー形成能を調べたところ、一部でコロニー形成の低下が見られた。また、(3) ホーミング現象を試験管内で再現するため、セルトリ細胞をフィーダーとした培養系の開発を行った。GS細胞をセルトリ細胞と共培養すると、MEF (mouse embryonic fibroblast)の場合と異なり、フィーダー細胞の下に細胞が潜り込み、コロニー形成することから、これを用いてホーミングアッセイができる可能性が示唆された。

The aim of this study is to clarify the molecular mechanisms involved in sperm formation and stem cell transplantation. The research representative of this study is the same as the research representative of β1- 4 - 5 - 4 - 5β1-cell migration is associated with the development of sperm stem cells and the retention of basement membrane in stem cells. This year's research has identified candidate molecules for G protein (especially rho, rac, cdc42), such as protein Integrin, Cadherin, etc. (1)Cultured sperm stem cell lines (GS cells) contain rho, rac, cdc42, mutant gene transfer, reproductive activity, extracellular adhesion, and wild-type gene transfer. Transplantation of rice seeds into rice seeds One side,(2) conditional (3) The development of cell culture system was studied. The possibility of GS cell co-culture and MEF (mouse embryonic fibroblast) is demonstrated in different situations.