哺乳動物個体に導入された外来遺伝子の安定性の検討

检查引入哺乳动物个体的外源基因的稳定性

• 批准号: 63619508
• 负责人: 井上 正
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-63619508/
• 关键词: トランスジェニックマウス; ラムダファージ; 外来遺伝子

トランスジェニックマウスとラムダファージ試験管内パッケージ法を用いて、哺乳動物生殖細胞/個体レベルで外来遺伝子の安定性を検討しうる系の開発を目指し、以下の実験を行なった。大腸菌supF遺伝子はamber変異をサプレスするが、この遺伝子をプラスミドpBR322に組込みさらにこれをラムダファージEMBL3に導入し多くの組換え体を得、これらの制限酵素地図を作成するとともに、試験管内パッケージの効率の高いものを選択した。組換えファージのsupF遺伝子に生じた突然変異は、適当な大腸菌指示菌(lacZam)を用いてプラークの色の変化として、容易に検出できるとともに、変異部分の塩基配列も簡単に決定できる。実際、このファージを、紫外線照射した大腸菌内で増殖させると、線量に依存して突然変異頻度が増加し、突然変異株の塩基配列を決定できた。上記組換えファージDNAをマウス受精卵に導入し、ラムダに含まれるsupFをトランスジーンとして保有するマウス系統が樹立されれば、その精子DNAをパッケージすることにより、マウス生殖細胞で生じたsupFの変化を大腸菌を用いて検出/定量できるはづであり、目下トランスジェニックマウスの作出を目指して動物を処理している。

The development of a system for the study of the stability of exotic genes in mammalian germ cells/individuals using the in-tube method is described below. E. coli supp. amb. c. d. c. d. c. c. d. c. c. d. d The change of color and color of the indicator bacteria (lacZam) can be easily detected, and the basic arrangement of the different parts can be determined. In the meantime, the frequency of mutation and mutation in E. coli increased due to ultraviolet irradiation and radiation quantity. In the above description, the DNA of the fertilized egg is introduced, the sperm is stored, and the sperm DNA is stored. The DNA of the fertilized egg is stored, and the sperm is stored. The DNA of the fertilized egg is stored, and the sperm is stored.

项目成果

Ohta,T.・Watanabe,M.・Shirasu,Y.・Imoue,T.: Mutation Res.201. 107-112 (1988)

Ohta, T.、Watanabe, M.、Shirasu, Y.、Imoue, T.：突变研究 107-112 (1988)。

Kuroda,Y.・Inoue,T.: Mutation Res.

Kuroda, Y., Inoue, T.：突变研究。