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カルシウムイオンによる血小板細胞内顆粒分泌の制御機構

钙离子控制血小板细胞内颗粒分泌的机制

基本信息

批准号：
63641520
负责人：
滝澤温彦
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

電場効果により細胞膜透過性を高めたウシ血小版は、Mg-ATP存在下、細胞外に加えるカルシウムに依存してセロトニンを分泌する。カルシウムによる分泌反応の制御機構を明らかにするため、はじめに分泌反応に伴う細胞内構造の変化を電子顕微鏡を用いて調べた。その結果、多くの分泌顆粒はカルシウ刺激によらず、マイクロフィラメント構造と相互作用しており、細胞膜近傍に存在していることが明らかになった。他方、高濃度カルシウム処理-カルパイン活性化により分泌能を失った血小板標品ではマイクロフィラメントが断片化し、細胞膜からはがれ、顆粒との相互作用も失っていた。顆粒とマイクロフィラメントの相互作用は血小板から単離した顆粒分画の電子顕微鏡および蛍光顕微鏡による観察からも明らかにされた。また顆粒分画にアクチンが存在することはSDS電気泳動による分析から確かめられた。さらに。カルシウム前処理により分泌能を失った血小板から分離した顆粒分画にはマイクロフィラメントはほとんど含まれず、SDS電気泳動による分析からミオシン、分子量8.8万タンパク質とアクチンが顕著に減少していることが分かった。つぎに分泌能を失った血小板で、どのようなタンパク質成分が変化しているか調べた。その結果、アクチン結合タンパク質としてフィラミンと分子量8.8万タンパク質がカルシウム前処理により減少していることが分かった。これらの結果は、マイクロフィラメント構造には顆粒を分泌可能な保持する役割があり、分子量8.8万の新しく見い出されたアクチン結合タンパク質が、顆粒とマイクロフィラメントの結合に関与していることを示唆している。今後このタンパク質を分離・精製することにより、カルシウムイオンによる顆粒分泌反応の分子レベルでの機構が明らかにされることが期待される。

The effect of electric field on cell membrane permeability is high. In the presence of Mg-ATP, the extracellular membrane depends on the secretion of Mg-ATP. The regulatory mechanism of secretory reactions in the kalashnikov system can be clearly understood, and the secretory reactions accompanied by changes in intracellular structures can be modulated using electronic microscopes. As a result, many secretory granules are stimulated, structurally interacted, and present near the cell membrane. Other drugs, high concentrations of the drug treatment-secretion of active substances, loss of platelet markers, fragmentation of cell membranes, loss of particle interaction The interaction between particles and electron microscopy The particle size distribution was determined by SDS electrokinetic analysis.さらに。Before the treatment, the secretion energy was lost, the platelet was separated, the particle was separated, and the molecular weight was 88,000. In addition, the secretion of energy can be reduced by platelet, and the quality of the substance can be changed. As a result, the molecular weight of 88,000 particles was reduced by pretreatment. As a result, the structure of the particles was maintained, and the molecular weight was 88,000. In the future, the mechanism of particle secretion and molecular metabolism in the separation and purification of protein is expected.