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新たな遺伝子クローニングシステムNACSを応用した疾患遺伝子の同定

新たな遺伝子クローニングシステムNACSを応用した疾患遺伝子の同定
使用新基因克隆系统 NACS 鉴定疾病基因
批准号：
15012208
负责人：
荒瀬 尚
金额：
$3.78万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2003 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15012208/
关键词：
cDNAライブラリーレトロウィルスリンパ球ITAMリン酸化シグナル伝達エストロジェンレセプターCD8

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项目成果

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私どもは、新たな機能的遺伝子クローニングシステムとしてNACS法(NFAT Activating Molecule Cloning System)を開発した.本研究では、NACS法の応用法を開発することによって、新たな細胞活性化機構、細胞分化機構の解明を目指し、それを基にヒト疾患遺伝子を明らかにすることを目的とし、今年度より本研究班で研究を始めた。NACS法では、ランダムプライマーで作成したcDNAライブラリーとCD8分子の細胞外領域とのキメラが作られるライブラリーを作製することになるため、cDNAライブラリーの質が、決定的に重要である。そこで、本年度ではまず、cDNAライブラリーの質を高めるために、cDNAの合成条件を検討した。今までのライブラリーでは、cDNAの合成長が長過ぎるために、翻訳開始点より上流からCD8とのキメラになっているクローンが多く、そのために、目的の遺伝子がクローニングできない欠点が認められた。そこで、cDNA合成の際に、ランダムプライマーの濃度を通常の50倍程度にすることにより、比較的小さいサイズのCD8キメラライブラリーを作成することに成功した。実際、新たに作成したライブラリーでスクリーニングすることにより、今までにクローニングできなかったCD3ζ等の既知のITAMを有する分子のほか、新たな4回膜貫通型の活性化制御分子をクローニングすることに成功した。そこで、本研究では、今回確立した、ライブラリー作成方法を基に、さらに、他の組織のライブラリーの作成を進めるほか、エストロジェンレセプターとのキメラライブラリーを作成することにより、転写因子等の新たな、リンパ球活性化制御分子のクローニング方法の確率を目指す。
期刊论文(10)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Arase, N.: "IgE-mediated activation of NK cells through Fc γ RIII."J.Immunol.. 170・6. 3054-3058 (2003)
Arase, N.：“IgE 通过 Fc γ RIII 介导的 NK 细胞激活。”J.Immunol.. 170・6 (2003)。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Lodoen, M.: "NKG2D-mediated natural killer cell protection against cytomegalovirus is impaired by viral gp40 modulation of retinoic acid early inducible 1 gene molecules."J.Exp.Med.. 197・10. 1245-1253 (2003)
Lodoen, M.：“NKG2D 介导的针对巨细胞病毒的自然杀伤细胞保护受到视黄酸早期诱导 1 基因分子的病毒 gp40 调节的损害。”J.Exp.Med. 197・10 (2003)。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Shiratori, I.: "Activation of Natural Killer Cells and Dendritic Cells upon Recognition of a Novel CD99-like Ligand by Paired Immunoglobulin-like Type 2 Receptor."J.Exp.Med.. 199・4. 525-533 (2004)
白鸟 I.：“配对免疫球蛋白样 2 型受体识别新型 CD99 样配体后的自然杀伤细胞和树突状细胞的激活”，J.Exp.Med. 199・4。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Sakurai, D.: "FcεRIγ-immunoreceptor tyrosine-based activation motif is differentially required for mast cell function in vivo."J.Immunol.. 172・4. 2374-2381 (2004)
Sakurai, D.：“体内肥大细胞功能需要基于 FcεRIγ-免疫受体酪氨酸的激活基序。J.Immunol.. 2374-2381 (2004)”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Understanding the pathogenesis of infectious and immune diseases through integrated understanding of host-pathogen interactions
  • 批准号：
    22H04989
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (S)
  • 资助金额：
    $123.39万
  • 财政年份：
    2022
  • 负责人：
    荒瀬 尚
  • 依托单位：
    Osaka University
ペア型免疫受容体を介した宿主病原体相互作用の解明
  • 批准号：
    18H04029
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
  • 资助金额：
    $28.37万
  • 财政年份：
    2018
  • 负责人：
    荒瀬 尚
  • 依托单位：
    Osaka University
Studies on the regulation of infection and immunity via paired receptors
  • 批准号：
    18H05279
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (S)
  • 资助金额：
    $123.8万
  • 财政年份：
    2018
  • 负责人：
    荒瀬 尚
  • 依托单位：
    Osaka University
ミスフォールド蛋白質／ＭＨＣクラスＩＩ分子複合体に対する自己抗体の産生機構の解明
  • 批准号：
    15F15115
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $1.54万
  • 财政年份：
    2015
  • 负责人：
    荒瀬 尚
  • 依托单位：
    Osaka University
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