コンディショナルRac1欠損マウスを用いた発がんの研究

使用有条件的 Rac1 缺陷小鼠进行致癌研究

基本信息

  • 批准号:
    15023237
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 4.1万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    2003
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2003 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

個体レベルでRhoファミリーG蛋白質Racの発がんに関する役割を検討するため、発がん・転移に関与すると考えられるRac1およびRac3をコンディショナルにノックアウトするマウスの作製を行なった。すなわち1)rac1遺伝子の開始コドンを含むエキソンをloxPで挟んだアリルを導入したヘテロ型racl(+/flox)マウス、2)rac3遺伝子の開始コドンを含むエキソンの5'非翻訳領域にloxPを導入し、rac3遺伝子の最終エキソンのpolyA付加シグナルの3'領域にloxP-HcRedを導入したヘテロ型rac3(+/flox-HcRed)マウスをfeeder free ES細胞を用いたジーンターゲッティング法により作製した。また、in situハイブリダイゼーション法によりrac1,rac3mRNAの発現を検討し、rac1は胎児期から体全体で強く発現しており、rac3は幼弱期から神経系での発現が強く、特に発達期に強いシグナルが脳全体で見られるが、成熟脳での発現は低いことが明かとなった。さらに、Rac1及びRac3の欠損とがん遺伝子の発現が同時に同一の細胞で起こるためのマウスの作成も行った。すなわち、乳腺特異的プロモーターMMTV-LTRの制御下にドキシサイクリン投与によって転写活性が抑制できるテトラサイクリン調節性トランス活性化因子(tTA)を発現するTgと両方向性のテトラサイクリン応答因子(TRE)制御下にCreとポリオーマウイルスミドルT(PyV-mT)を発現するTgの2重Tgを前年度7系統作成したのに加え、今年度プロモーターと翻訳領域の間にイントロンを入れる等構築し直したTgを4系統作製した。新たに作製した4系統の内、1系統では生後9週で腫瘍を形成した。
Individual レ ベ ル で Rho フ ァ ミ リ ー G protein Rac の 発 が ん に masato す る service cut を beg す 検 る た め, 発 が ん, planning to move に masato and す る と exam え ら れ る Rac1 お よ び Rac3 を コ ン デ ィ シ ョ ナ ル に ノ ッ ク ア ウ ト す る マ ウ ス の cropping を line な っ た. す な わ ち 1) traces of rac1 伝 の started コ ド ン を containing む エ キ ソ ン を loxP で carry ん だ ア リ ル を import し た ヘ テ ロ type racl (+ / flox) マ ウ ス, 2) rac3 heritage 伝 の started コ ド ン を containing む エ キ ソ ン の 5 'non turn 訳 field に loxP を import し, rac3 伝 の son was finally エ キ ソ ン の Po LyA plus シ グ ナ ル の 3 'field に loxP - HcRed を import し た ヘ テ ロ type rac3 (+ / flox HcRed マ ウ ス を feeder free を ES cells with い た ジ ー ン タ ー ゲ ッ テ ィ ン グ method に よ り cropping し た. Youdaoplaceholder0, in Situ ハ イ ブ リ ダ イ ゼ ー シ ョ ン method に よ り rac1, rac3mRNA の 発 を now beg し 検, rac1 は fetal stage where か ら strong body all で く 発 now し て お り, rac3 は indecisive period か ら god 経 department で の 発 が strong く now, に 発 phase of strong に い シ グ ナ ル が 脳 all で see ら れ る が, mature 脳 で の 発 now は low い こ と が Ming となった となった. さ ら に, Rac1 and び Rac3 の owe loss と が ん posthumous son 伝 の 発 now が に の simultaneously cell で こ る た め の マ ウ ス の made line も っ た. す な わ ち, breast cancer-specific プ ロ モ ー タ ー MMTV - LTR の under the system of imperial に ド キ シ サ イ ク リ ン cast with に よ っ て planning write inhibition で が き る テ ト ラ サ イ ク リ ン regulatory ト ラ ン ス activation factor (tTA) を 発 now す る Tg と struck directional の テ ト ラ サ イ ク リ ン 応 a factor (TRE) under the system of imperial に Cre と ポ リ オ ー マ ウ イ ル ス ミ ド ル T (PyV - mT) を 発 now す る Tg の 2 year before heavy Tg を 7 system made し た の に え, our プ ロ モ ー タ ー と turn 訳 areas between の に イ ン ト ロ ン を into れ る such as constructing し straight し た Tg を 4 system system し た. The で abscess を formed 9 weeks after birth in the た4 system <s:1> and the 1 system で in the たに formation.

项目成果

期刊论文数量(4)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Chida et al.: "Disruption of protein kinase Cη results in impairment of wound healing and enhancement of tumor formation in mouse skin carcinogenesis"Cancer Res.. 63. 2404-2408 (2003)
Chida 等人:“蛋白激酶 Cn 的破坏导致小鼠皮肤癌变过程中伤口愈合受损和肿瘤形成增强”Cancer Res.. 63. 2404-2408 (2003)
  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Kuwajima et al.: "Subcellular and subsynaptic localization of group I metabotropic glutamate receptors in the monkey subthalamic nucleus."J.Comp.Neurol.. 印刷中. (2004)
Kuwajima 等人:“猴子底丘脑核中 I 类代谢型谷氨酸受体的亚细胞和突触下定位。”J.Comp.Neurol.. 正在出版(2004 年)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
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