mGluR1トランスジェニックマウスを用いた神経可塑性の研究

mGluR1转基因小鼠的神经可塑性研究

• 批准号: 15016076
• 负责人: 饗場 篤
• 金额: $ 4.42万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15016076/
• 关键词: mGluR1; トランスジェニックマウス; プルキンエ細胞; 運動協調; mGluR1b; Homer; Vesl; 登上線維

L7プロモーター下にmGluR1bcDNAを発現させるベクターをインジェクトし、5系統の独立なm GluR1(-/-)/L7-mGluR1b(Tg/+)マウスを作製し、2系統では運動失調が見かけ上なくなった。In situ hybridization法により、運動失調が見かけ上なくなった系統のマウスではmGluR1b mRNAが中枢神経系でプルキンエ細胞のみで発現することが確認できた。また、免疫沈降実験、ウェスタンブロット法により、このマウスの小脳でmGluR1サブタイプのうち、mGluR1bのみが発現していること、mGluR1bにはHomer/Ves1蛋白質は結合していないことを確認した。このマウス同士の交配により得られたTgがホモ接合のマウスを用いた解析結果では、ローターロッド試験での運動協調能がレスキューされたのにも関わらず、登上線維の多重支配はレスキューされなかった。すなわち、mGluR1aの長い細胞内C末端と相互作用するHomer/Vesl等のシナプス後部に存在するadaptor蛋白質やscaffold蛋白質は、プルキンエ細胞でのmGluR1依存的なシグナルのうちでも、運動協調に必要なシグナル伝達には必須ではないが、登上線維シナプスの除去には必要であることが示唆された。また、このマウスの解析結果から登上線維の多重支配は運動学習に影響をおよぼさない可能性があると考えられる。また、Gene-driven mutagenesisによりmGluR1aのC末端領域にアミノ酸置換を伴う点変異が導入されたマウスを2種類得ることができた。このうち、リン酸化される可能性のある1119番目のアミノ酸残基がチロシン(Y)からフェニルアラニン(F)に置換されたマウスをmGluR1(+/-)と交配中で、mGluR1のアリルが欠損と点変異(Y1119F)となる仔マウスが得られる予定である。

The mGluR1b cDNA of L7-mGluR1 (Tg/+) was detected in the lower part of L7-mGluR1, 5-system independent mGluR1 (-/-)/L7-mGluR1b (Tg/+) and 2-system ataxia was detected in the upper part of L7-mGluR1b. In situ hybridization method, ataxia can be identified by mGluR1b mRNA expression in central nervous system. The expression of mGluR1 protein and mGluR1b protein in Homer/Ves1 protein was confirmed. The analysis results show that the motion coordination ability of the two species is related to the relationship between the two species, and the relationship between the two species is related to the relationship between them. The C-terminal interaction between mGluR1a and Homer/Vesl in the long cell has adaptor protein and scaffold protein, and the mGluR1-dependent mGluR1a in the long cell has necessary motor coordination. The analysis results show that there is a possibility of multiple dominance in linear learning. Gene-driven mutagenesis is introduced into the C-terminal domain of mGluR1a. The possibility of this mutation is 1119. The mutation of mGluR1 (+/-) is 1119.

项目成果

Chida et al.: "Disruption of protein kinase Ci^results in impairment of wound healing and enhancement of tumor formation in mouse skin carcinogenesis."Cancer Res.. 63. 2404-2408 (2003)

Chida 等人：“蛋白激酶 Ci 的破坏导致小鼠皮肤癌变过程中伤口愈合受损和肿瘤形成增强。”Cancer Res.. 63. 2404-2408 (2003)

Kuwajima et al.: "Subcellular and subsynaptic localization of group I metabotropic glutamate receptors in the monkey subthalamic nucleus."J.Comp.Neurol.. 印刷中. (2004)

Kuwajima 等人：“猴子底丘脑核中 I 类代谢型谷氨酸受体的亚细胞和突触下定位。”J.Comp.Neurol.. 正在出版（2004 年）。